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荧光染料CY3-NHS标记蛋白Ex=555 nm/Em=565 nm

2023年10月14日 14:42 来源:新维创生物科技(重庆)有限公司

            CY3-NHS标记蛋白Ex=555 nm/Em=565 nm

Cyanine 3(Cy3),是花青素荧光素染料家族的成员之一,是化学合成的聚甲炔染料。目前Cyanine系列染料有两种异构体形式,一种是非磺化花青素(non-sulfonated cyanines),一种是磺化花青素(sulfonated cyanine)。两者的光谱性质几乎一致,因此大部分应用可相互替换,比如,都可用于标记DNA或蛋白等生物分子。两者的主要区别在于:磺化染料是水溶性的,在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂,并且降低染料在水中聚集的可能性,增强标记效率。

磺化Cyanine 3(Cy3),易溶于水,Ex=555 nm,Em=565 nm,具有明亮荧光,光稳定性强,pH非敏感性等优点,适用于标记多肽、蛋白以及核酸等生物分子,以通过后续荧光成像以及其他荧光生物学方法分析目的蛋白。

Cy3 NHS ester,即含N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide)活化基团的Cy3,可直接与生化分子上的氨基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键,主要是伯胺。

注意事项

1)NHS ester基团对湿度非常敏感,务必干燥保存产品。使用前产品需放到室温回温至少20min。

2)NHS ester基团的水解发生在水溶性缓冲体系属于竞争性反应。对蛋白/多肽(浓度:1-1mg/ml)伯胺的连接反应建议在pH 7-9范围内进行。使用不含氨基的缓冲体系,pH 7-9。比如100 mM 磷酸钠,150 mM 氯化钠, pH 7.5; 100mM Hepes, pH 7.5。100 mM 碳酸钠/碳酸氢钠, pH 8-9;或100mM 硼酸缓冲液, pH 8-9。

3)不要使用含伯胺的任何缓冲液,比如Tris,甘氨酸。

CY3-NHS.jpg


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