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2025年03月17日 11:15 来源：http://www.xwcbio.com/
中文名称：花菁染料CY3链霉亲和素
英文名称：Cy3-Streptavidin（Cy3-SA）
外观与剂型
冻干粉末：呈橙红色疏松状固体，复溶后溶液呈澄清透明橙红色，无可见沉淀。
溶解性：易溶于磷酸盐缓冲液（PBS）或Tris缓冲液（pH 7.2-8.0），溶解度>5 mg/mL，无需有机溶剂辅助。
光谱特性
荧光参数：Cy3的最大吸收波长550 nm，发射波长570 nm，消光系数（ε）为150,000 M⁻¹cm⁻¹，量子产率约0.15。
光稳定性：在持续光照下（功率密度10 mW/cm²），荧光半衰期约1200秒，优于FITC等染料。
分子结构与组装
四聚体结构：链霉亲和素（SA）以四聚体形式存在，每个亚基含一个生物素结合位点，Cy3标记后分子量约60 kDa（单体）+ 670 Da（Cy3）。
标记位点：Cy3通过赖氨酸残基的ε-氨基与SA共价连接，标记比通常为1-3个Cy3/SA四聚体。
稳定性与储存
温度敏感性：4℃储存稳定6个月，-20℃可保存2年以上；反复冻融不超过5次。
pH适应性：在pH 6-9范围内稳定，极端pH（<5或>10）可能导致Cy3轻微脱落或蛋白变性。
生物素结合能力
亲和力：Cy3标记不改变SA对生物素的结合常数（Kd≈10⁻¹⁵ M），可形成稳定复合物。
结合容量：每mol Cy3-SA可结合4 mol生物素化分子（如抗体或核酸），无显著空间位阻。
荧光各向异性
旋转特性：Cy3-SA的荧光各向异性值（r）约为0.25，反映其在溶液中的较大分子量与缓慢旋转。
胶体行为
粒径分布：动态光散射（DLS）显示Cy3-SA水合粒径约5-8 nm，多分散指数（PDI）<0.2。
表面电荷
Zeta电位：在生理条件下（pH 7.4）带负电（-5至-15 mV），可通过静电作用与带正电的纳米材料结合。
紫外-可见光谱：监测280 nm（蛋白）和550 nm（Cy3）吸收峰，计算标记比。
荧光共振能量转移（FRET）：与生物素化荧光受体（如Cy5-Biotin）构建FRET对，验证结合效率。
圆二色光谱（CD）：分析二级结构，确认标记后β-折叠含量保持>80%。
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