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2023年10月11日 14:08 来源:新维创生物科技(重庆)有限公司
中文名称:荧光素标记鬼笔环肽
英文名称:Fluorescein-Phalloidin
CAS号:84313-38-2
分子式:C56H60N10O15S2
分子量:1177.27
荧光素-鬼笔环肽(Fluorescein Phalloidin)的应用:
荧光素鬼笔环肽复合物可用于可视化和定量组织切片、细胞培养物或无细胞制备物中的 F-actin 肌动蛋白。荧光素鬼笔环肽复合物完全兼容细胞分析过程使用的其他荧光染色剂,包括荧光蛋白、Qdot™ 纳米晶体和 Alexa Fluor™ 偶联物(包括二抗)。
荧光素-鬼笔环肽(Fluorescein Phalloidin)的使用方法:
一、制备 1× Fluorescein Phalloidin 工作溶液:
在含有 1% BSA 的 1 mL PBS 中加入 1 μL 的 1000× 荧光素鬼笔环肽 DMSO 溶液。
注意:
1. 不同的细胞类型可能会有不同的染色。荧光素鬼笔环肽工作溶液的浓度应相应配制。
2. 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 用于减少非特异性背景染色。
二、染色细胞:
1. 用 PBS 清洗细胞 2-3 次。在室温下将细胞固定在 PBS 中的 3.7% 无甲醇甲醛溶液中 10-30 分钟。
注意:避免使用任何含有甲醇的固定剂,因为甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白。优选的固定剂是不含甲醇的甲醛。
2. 用 PBS 清洗固定的细胞 2-3 次。
3. 可选:将 PBS 中的 0.1% Triton X-100 添加到固定细胞中 3-5 分钟以增加渗透性。在 PBS 中清洗细胞 2-3 次。
4. 将荧光素鬼笔环肽工作液100 μL/孔(96孔板)加入固定的细胞中,室温染色20~90分钟。
5. 用 PBS 轻轻冲洗细胞 2-3 次,以去除多余的荧光素鬼笔环肽。
6. 在所需的 Ex/Em 波长下运行荧光显微镜或其他设备(荧光素鬼笔环肽,Ex/Em=497/516 nm)。
荧光素-鬼笔环肽结构式:
荧光素-鬼笔环肽荧光图谱:
实验注意事项:
1. 避光保存,避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。
2. 在4℃条件下、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,使用前可以20-25℃水浴片1-5分钟至全融解后使用。对于微量的液体,使用前需要离心数秒钟后,使液体充分沉降到管底;
3. 本产品仅供科学研究使用!
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