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2023年09月15日 11:53 来源：新维创生物科技（重庆）有限公司
荧光染料的原理
荧光染料 的一个基本原理是在荧光剂的帮助下对细胞成分进行高度特异性的可视化。这可以是一种荧光蛋白——例如 GFP——在基因上与感兴趣的蛋白质相关联。如果克隆是不可能的——例如在组织学样本中——使用免疫荧光染色等技术来可视化感兴趣的蛋白质。为此，使用与不同荧光染料连接并直接或间接与适当目标结构结合的抗体。在荧光染料的帮助下，荧光显微镜不仅限于蛋白质，还可用于检测核酸、聚糖和其他结构。您甚至可以使用特定应用的各种活细胞染料，这些染料允许使用细胞器选择性染色（例如 ER、线粒体、高尔基体）或功能测定（例如，例如活细胞追踪、标记、细胞增殖或活死细胞测定，其中荧光是读出方式。甚至可以检测到钙离子等非生物物质。在荧光显示过程中，有两种方法可以显示您感兴趣的蛋白质。要么借助内在荧光信号——通过将荧光蛋白与靶蛋白进行基因连接——要么借助与目标蛋白特异性结合的荧光标记抗体。对于一些生物学问题，执行后一个问题更有用甚至是必要的。例如，在组织学样本的情况下，不可能使用荧光蛋白，因为通常样本来自不含有任何荧光蛋白的生物体。此外，如果有功能性抗体可用，免疫荧光比荧光蛋白技术快得多，在荧光蛋白技术中，您必须克隆感兴趣的基因并将 DNA 转染到足够的细胞中。荧光蛋白的另一个缺点在于它们本身就是蛋白质的性质。有了它，它们在细胞内具有特定的蛋白质特征，这可能导致功能障碍或对所附着的感兴趣蛋白质的误解。然而，应该考虑使用荧光蛋白通常是研究活细胞的首选方法。
免疫荧光利用抗体对其抗原的非常特异性的结合亲和力。这可以有两种不同的外观。最简单的方法是使用一种与感兴趣的蛋白质结合的荧光标记抗体。这称为直接免疫荧光。
新维创生物科技（重庆）有限公司
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