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蛋白如何标记上荧光?异硫氰酸荧光素标记蛋白牛血清白蛋白/卵清蛋白/转铁蛋白

2024年07月18日 15:44 来源:http://www.xwcbio.com/

蛋白如何标记上荧光?异硫氰酸荧光素标记蛋白牛血清白蛋白/卵清蛋白/转铁蛋白

产品名称:FITC-BSA

产品名称:CY5-BSA

产品名称:FITC-Transferrin

产品名称:CY5-Transferrin

供应商:重庆新维创生物

 

将蛋白质标记到荧光素异硫氰酸酯(FITC)上的过程通常涉及一系列步骤

一、准备阶段

准备蛋白质溶液:

将需要标记的蛋白质溶解在适当的缓冲液中,使其浓度达到适合标记的浓度。通常,蛋白质的浓度应足够高以确保标记反应的效率。

确保蛋白质溶液纯净,无其他杂质或抑制标记反应的成分。

准备FITC溶液:

将FITC溶解在无水DMSO(二甲基亚砜)中,制成高浓度的储备液(如1mg/mL)。

使用前,根据需要将储备液稀释到适当的标记浓度。注意避光操作,因为FITC对光敏感。

二、标记反应

混合反应体系:

将蛋白质溶液和FITC溶液按一定比例混合,通常蛋白质与FITC的摩尔比为1:10至1:50。

在反应体系中加入适量的缓冲液,使总体积适中(如100μL左右),以确保反应条件的一致性。

控制反应条件:

将反应体系置于室温或特定温度(如37°C)下孵育一段时间(通常为1-2小时),以促进标记反应的进行。

严格控制温度和pH值,因为过高或过低的温度以及pH值的波动都可能影响FITC与蛋白质的结合效果。

三、终止反应与纯化

终止反应:

标记反应结束后,加入适量的终止液(如甘氨酸或硼酸缓冲液)以终止反应。

纯化标记蛋白:

为了去除未结合的FITC,需要对标记蛋白进行纯化。常用的纯化方法包括凝胶过滤、透析或离心等。

通过多次透析或离心,确保彻底去除未结合的FITC,以避免背景荧光的干扰。

CY3标记丙泊酚 CY3-2,6-Diisopropylphenol

CY5标记丙烯酸羟乙酯 CY5-2-Hydroxyethyl acrylate

FITC标记链霉亲和素  FITC-Streptavidin

荧光素标记牛血清白蛋白 FITC-BSA

CY5标记牛血清白蛋白 CY5-BSA

荧光素标记转铁蛋白 FITC-Transferrin

CY5标记转铁蛋白 CY5-Transferrin

荧光素纤维蛋白原(牛) FITC-Fibrinogen

CY5纤维蛋白原(牛) CY5-Fibrinogen

CY3纤维蛋白原(牛) CY5-Fibrinogen

荧光素标记刀豆球蛋白A FITC-ConA

FITC.jpg

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