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2023年09月05日 10:38 来源:新维创生物科技(重庆)有限公司
Cyanine5-NHS/CY5-SE 蛋白质相互作用研究
Cyanine5-NHS (CY5-NHS) ester是一种荧光染料,NHS表示其具有N-羟基琥珀酰亚胺酯活性基团。CY5-NHS ester可以用于蛋白质相互作用研究,特别是用于荧光共振能量转移(FRET)等技术,以揭示蛋白质间的相互作用和结合事件。
蛋白质相互作用研究中使用CY5-NHS ester的常见步骤包括:
1、蛋白质标记:
首先,将CY5-NHS ester与目标蛋白质共偶联,通常是在碱性条件下将CY5-NHS ester与蛋白质中的氨基(-NH2)基团发生反应,形成共价键连接。这样可以实现CY5-NHS ester的共价标记,并将荧光染料引入到蛋白质分子中。
2、荧光共振能量转移(FRET):
CY5-NHS ester标记的蛋白质可以与另一种荧光标记蛋白质(通常是另一种激发波长的荧光染料标记的蛋白质)进行相互作用研究。在FRET技术中,当两个标记蛋白质相互接近并存在重叠的荧光光谱区域时,通过能量转移过程,一个荧光染料的激发能量传递给另一个染料,导致另一个染料发射荧光。这种FRET信号可以用来定量分析蛋白质之间的结合强度和相互作用距离,从而揭示蛋白质相互作用的特性。
蛋白质相互作用研究中使用CY5-NHS ester的优势:
1、CY5-NHS ester的共价标记可确保荧光染料牢固地连接到蛋白质上,避免染料的游离和漂洗步骤中的丢失。
2、CY5-NHS ester具有较高的荧光量子产率和光稳定性,适用于长时间的实验和高灵敏度的检测。
3、CY5-NHS ester标记的蛋白质可以与其他荧光标记蛋白质进行多色共振能量转移实验,实现多个相互作用事件的同时监测。
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