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2024年06月22日 14:07 来源:http://www.xwcbio.com/
荧光素标记内毒素(LPS)是一种用于生物学研究和诊断目的的重要技术。
一、标记原理
荧光素标记内毒素是通过将荧光素(如异硫氰酸荧光素,FITC)与内毒素(LPS)结合,形成稳定的共价键,从而使内毒素具备荧光特性。这一技术常用于研究和诊断与内毒素相关的疾病和感染。
二、标记方法
内毒素解聚:首先,将内毒素(LPS)解聚为单体,以便更好地与荧光素结合。
加入表面活性剂和荧光素:在37°C的中性溶液中,向内毒素单体中加入表明活性剂,并加入FITC进行标记,通常标记时间为18小时。
分离纯化:使用截留分子量3000D的Ultra-4超滤离心管将小分子游离的FITC及其他杂质从FITC-LPS中分离纯化。
荧光值测定:用荧光分光光度计分别测定标记反应液和纯化后的FITC-LPS溶液的荧光值,通过比较两者荧光值来测定荧光标记率。
三、标记特点
高灵敏度:荧光素标记使内毒素能够在低浓度下被检测,提高了检测灵敏度。
高特异性:荧光素与内毒素的特异性结合保证了标记的特异性,减少了非特异性干扰。
稳定性好:形成的荧光素标记内毒素复合物具有较高的稳定性,适用于长期存储和运输。
四、应用领域
生物学研究:用于研究内毒素在细胞内的分布、转运和代谢过程,以及内毒素与细胞受体的相互作用等。
临床诊断:在感染性疾病的诊断中,荧光素标记内毒素可用于快速检测病原体,提高诊断速度和准确性。
药物研发:在抗生素和内毒素抑制剂等药物的研发中,荧光素标记内毒素可用于评估药物对内毒素的抑制效果和机制。
五、注意事项
标记条件:在进行荧光素标记时,需要严格控制反应条件,如温度、pH值和反应时间等,以确保标记效果和稳定性。
纯化过程:在分离纯化过程中,需要注意避免荧光素的损失和污染,以保证标记产物的纯度和质量。
存储条件:荧光素标记内毒素应保存在低温、避光的环境中,避免长时间暴露于光照和高温条件下,以保持其稳定性和荧光特性。
荧光素标记阿霉素 FITC-Doxorubicin
CY5标记阿霉素 CY5-Doxorubicin
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CY5标记姜黄素 CY5-Curcumin
CY2标记姜黄素 CY2-Curcumin
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荧光素标记雷公藤红素 Celastrol
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