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2024年06月20日 10:48 来源:http://www.xwcbio.com/
在使用CY3.5-NHS标记蛋白时,需要注意以下事项以确保实验的准确性和可靠性:
避免高温和潮湿:
CY3.5-NHS是一种对光和湿度敏感的化合物,因此应存放在干燥、阴凉、避光的地方。
避免长时间暴露在高温和潮湿的环境中,以免影响其稳定性和活性。
避免与氧化剂接触:
CY3.5-NHS是一种还原性化合物,与氧化剂接触会引发化学反应,导致试剂失效。
在存储和取用过程中,应避免与氧化剂、强酸、强碱等化学物质接触。
选择合适的反应条件:
反应需要在适当的pH值下进行,通常是在pH 7.0-9.0之间。
由于CY3.5-NHS脂溶性的优点,它可以在水相和有机相之间进行反应,但需要注意选择合适的溶剂和反应体系。
标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。
纯化标记产物:
如果需要,可以通过透析或层析等方法对标记产物进行纯化,以去除未反应的试剂和杂质。
评估生物分子的活性:
NHS标记可能会影响生物分子的活性,因此在使用前需要进行活性评估。
使用不含氨基的缓冲体系:
标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS)、Hepes缓冲液、碳酸氢钠缓冲液或硼酸缓冲液等。
不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,如Tris、甘氨酸等,它们会和CY3.5上的伯胺竞争。
注意高浓度咪唑的影响:
高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应,因此在实验中需要避免使用高浓度的咪唑。
反应时间的控制:
反应时间需要控制得当,以确保反应充分进行但不过度,从而避免产物的降解或副反应的发生。
遵循以上注意事项,可以确保CY3.5-NHS标记蛋白实验的准确性和可靠性。
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne
水溶性-CY5.5-炔基 Sulfo-CY5.5-Alkyne
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS
水溶性-CY5.5-活性酯 Sulfo-CY5.5-NHS
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