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2024年06月03日 14:09 来源：http://www.xwcbio.com/
CY5.5马来酰亚胺CY5.5- Maleimide 的标记方法巯基反应染料
Cy5.5 Maleimide的标记方法主要涉及到与含有巯基的生物大分子（如蛋白质和肽）的特异性共价结合。
1. 蛋白质标记方法
巯基反应：
原理：Cy5.5 Maleimide中的马来酰亚胺与蛋白质中的游离巯基(-SH)发生反应，形成稳定的共价结合。
操作：将Cy5.5 Maleimide与含有游离巯基的蛋白质混合，允许其反应。
列宁试剂反应（若蛋白质中的巯基被二硫键遮蔽）：
原理：首先使用列宁试剂（如DTT）还原蛋白质中的二硫键，暴露出游离的巯基，随后Cy5.5 Maleimide与这些巯基反应。
操作：先用列宁试剂处理蛋白质，然后与Cy5.5 Maleimide反应。
2. 细胞标记方法
活细胞表面标记：
原理：在细胞表面引入具有巯基官能团的标签分子（如小分子探针或抗体），然后Cy5.5 Maleimide与这些巯基反应。
操作：先使用带有巯基的标签分子标记细胞，随后加入Cy5.5 Maleimide进行反应。
细胞穿透标记：
原理：将Cy5.5 Maleimide直接添加到细胞培养基中，允许其穿透细胞膜并与细胞内的巯基反应。
操作：简单地将Cy5.5 Maleimide加入细胞培养基中，进行孵育。
细胞内标记：
原理：通过细胞穿孔方法或适当的载体将Cy5.5 Maleimide引入细胞内，使其与细胞内的巯基反应。
操作：使用特定的细胞穿孔方法或载体，将Cy5.5 Maleimide引入细胞内部。
注意事项
反应条件：选择适当的反应条件和浓度，以确保Cy5.5 Maleimide与目标生物分子的特异性结合，避免非特异性结合和背景荧光。
验证效果：反应后，可以通过凝胶电泳或其他分析方法验证标记的效果，并确保荧光染料的稳定性和活性。
脂溶性-CY5.5-羧基 CY5.5-COOH 1144107-80-1
水溶性-CY5.5-羧基 sulfo-CY5.5-COOH 2183440-68-6
脂溶性-CY5.5-氨基 CY5.5-NH2 2097714-45-7
水溶性-CY5.5-氨基 sulfo-CY5.5-NH2 2143449-51-6
脂溶性-CY5.5-炔基 CY5.5-Alkyne 1628790-37-3
脂溶性-CY5.5-活性酯 CY5.5-NHS 1469277-96-0
脂溶性-CY5.5-马来酰亚胺 CY5.5-MAL 1593644-50-8
水溶性CY5.5-N3 Sulfo-CY5.5-N3 2382994-65-0
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