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2024年01月25日 10:25 来源：新维创生物科技（重庆）有限公司
在流式细胞术的细胞免疫学检测及免疫分型等实验中，各种荧光素偶联的抗体是必不可少的。荧光素的选择和搭配，通常会从以下5个方面进行考虑：
1、流式细胞仪的配置：仪器需配备可激发相应荧光素的激光管；对于多荧光素实验，仪器可同时检测多种细胞荧光。
2、染料的亮度与抗原表达量相适应：低表达量的抗原，推荐使用高亮度荧光素；高表达量的抗原，推荐使用低亮度荧光素。
3、荧光素之间的光谱重叠最小化：尽量选择光谱重叠小的荧光素组合，如FITC/PE-Cy7；选择不同激光激发的荧光素组合，如FITC/APC、PE/APC。
4、避免复合染料联合使用带来的假阳性：常见的复合染料有PE-Cy5、PE-Cy5.5、PE-Cy7、PerCP-Cy5.5、APC-Cy7等，复合染料的信号衰退会降低APC或PE的灵敏度。如果出现信号衰退，则：
● 减少样本暴露于光、高温或固定剂；
● 选择染料时考虑：复合染料的信号衰退会降低APC或PE的灵敏度，避免染料和其衍生物在同一细胞上标记。选择更稳定的tandem-dye（PerCp-Cy5.5）
● 如果样本需固定，选择稳定、可有效阻止复合染料信号衰退的固定剂多聚甲醛：冰上固定10min，离心除去多聚甲醛，将样品重悬于PBS中。
5、尽量使用红色激光激发自发荧光高的样本：每种细胞群都有不同水平的自发荧光。所有的荧光通道均可观察到自发荧光，但自发荧光强度在波长较长时迅速降低。对自发荧光较强的细胞，选择红光激发，发射波长长的荧光素（如APC）可得到较好的S/N比值；对自发荧光比较弱的细胞，发射波长长的荧光素对S/N提高没有明显的改善，可选用FITC。
希望上面这些知识可以更好地帮助您选择荧光素新维创生物是荧光染料源头厂家，种类丰富价格优惠性价比高，流式细胞术对荧光素的选择搭配有着很高的要求，尤其是对于多色实验来说，荧光素搭配效果直接影响到检测效果。
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