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2024年01月03日 09:58 来源:新维创生物科技(重庆)有限公司
CY 为花菁 (Cyanine) 的缩写,经典的菁染料含有两个含氮杂环,分子内部含有由甲川基 (CH)n 组成的共轭链,n 可为奇数或偶数。吸光度和荧光波长可通过选择聚次甲基桥的长度来控制:越长的花菁素具有越高的吸光度和发射波长 根据链中的碳原子数,菁类由甲川基被分为一甲基 (CY1,n=0)、三甲基 (CY3,n=1)、五甲基 (CY5,n=2) 和七甲基 (CY7,n=3)。
CY 染料分为非磺化花菁和磺化花菁
两者的光谱特性基本相同,在 DNA 和蛋白质的标记中,它们是可互换的,两种均可用于标记生物分子。磺化花菁染料具体水溶性,且不易在水中聚集,是抗体和蛋白标记的首选。
CY 活化基团的选择
根据需要标记的生物分子的可标记基团 (胺基、醛基或巯基) 以及酸碱性,选择相应的活化染料和反应条件。为减少空间位阻影响,
CY 花菁类染料优点
1) 光谱窄,信号强
2) 花菁类染料的摩尔吸光系数高于其他荧光染料
3) 磺化花菁类染料易溶于水,对组织细胞毒性小,适用于动物和细胞实验
4) 荧光波段在近红外区段的组织透过性更好。
CY 花菁类染料使用方法
以 NHS 活化脂 CY 标记蛋白为例
1) 将蛋白溶液与配置好的染料工作液倒入反应溶剂中
2) 用移液器上下轻打混匀
3) 常温下静置或轻微混动反应 3-5 个小时 (可过夜)
4) 反应结束后进行透析除去未标记染料
5) 避光放置在 4°C 保存。
日期:2024-01-03
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