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如何计算多肽荧光标记需要多少原料?

2023年11月24日 14:16 来源:新维创生物科技(重庆)有限公司

                  如何计算多肽荧光标记需要多少原料?

在多肽荧光标记中,通常其荧光分子的使用量是蛋白标记使用量的数十倍,甚至百余倍,比如想拿到5mg 95%荧光标记的多肽,至少需要200mg或300mg荧光分子。

多肽荧光标记通常在多肽合成过程中,就已经标记上,此时其他所有活性基团均被保护起来,所以多肽的荧光标记是非常精准的定点标记,最后再通过HPLC纯化,提高被标记肽的纯度至95%以上或98%以上。

打个比方:比如一段序列使用FITC标记
序列为:H2N-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9-COOH

序列中有3个氨基,均可分别标记上FITC,如

标记在N端氨基上:FITC-D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9

K6的侧链氨基上:D1-A2-G3-L4-E5-K6(FITC)-G7-V8-K9

K9的侧链氨基上:D1-A2-G3-L4-E5-K6-G7-V8-K9(FITC)

多肽荧光标记后,通常会采用高浓度三氟乙酸处理,处于强酸环境中,然后通过HPLC纯化。

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