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2025年09月16日 10:47 来源：
6-羧基-X-罗丹明琥珀酰亚胺酯（6-CR-X-Rhodamine-SE）是一种基于罗丹明染料骨架的荧光标记试剂，其核心结构由三部分组成：罗丹明荧光发色团、6位羧基（-COOH）修饰基团以及琥珀酰亚胺酯（NHS酯）活性基团。罗丹明发色团以氧杂蒽环为核心，通过共轭双键体系实现高效荧光发射；6位羧基的引入不仅增强了分子的水溶性，还为后续化学修饰提供了反应位点；而NHS酯基团则是其高反应活性的关键，可与生物分子（如蛋白质、抗体、核酸）中的伯胺（-NH₂）发生特异性共价结合，形成稳定的酰胺键。
6-CR-X-Rhodamine-SE继承了罗丹明家族的优异荧光性能，其最大激发波长约为560 nm（橙光区），最大发射波长为580 nm（黄光区），荧光量子产率高，光稳定性强。相较于传统罗丹明染料（如罗丹明6G），其6位羧基修饰显著降低了分子间聚集倾向，减少了荧光淬灭效应，尤其在低浓度或复杂生物环境中仍能保持明亮荧光信号。例如，在细胞成像实验中，标记后的抗体可清晰显示细胞膜表面抗原分布，背景干扰极低。
1. 生物分子标记：6-CR-X-Rhodamine-SE是蛋白质组学研究中的常用工具。通过与抗体或酶的赖氨酸残基反应，可制备荧光标记的生物探针，用于流式细胞术、免疫荧光染色或Western blot分析。例如，标记抗CD4抗体后，可精准检测T淋巴细胞亚群比例。
2. 活细胞成像：其脂溶性NHS酯可穿透细胞膜，与胞内蛋白结合，实现动态追踪。例如，标记微管蛋白后，可实时观察细胞分裂过程中纺锤体的形态变化。
3. 材料科学：该试剂可用于修饰纳米材料表面，赋予其荧光示踪功能。如将6-CR-X-Rhodamine-SE共价连接至金纳米颗粒，可构建光热-荧光双模态探针，用于肿瘤靶向成像与治疗监测。
优势：
· 反应特异性高：NHS酯与伯胺的反应选择性强，副产物少；
· 荧光性能优异：亮度高、稳定性好，适合长时间动态监测；
· 修饰灵活性：6位羧基可进一步偶联生物素、荧光淬灭基团等，拓展功能。
局限性：
· pH敏感性：NHS酯在碱性条件下（pH>8）易水解，需严格控制反应条件；
· 成本较高：罗丹明类染料合成步骤复杂，限制了大规模应用。
随着点击化学、生物正交反应的发展，6-CR-X-Rhodamine-SE的修饰效率有望提升，成本降低。此外，通过结构优化（如引入近红外发色团），可进一步拓展其在深层组织成像与临床诊断中的应用潜力。
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