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2025年12月16日 11:11 来源:
定义:
CY7标记小麦谷蛋白是将近红外荧光染料CY7(Cyanine7)通过共价偶联方式连接至小麦谷蛋白(glutenin)分子上形成的复合物。小麦谷蛋白是小麦面筋中的高分子量储存蛋白,主要由重复的多肽链通过二硫键交联构成,赋予面团弹性和延展性。CY7是一种七甲川花青素类荧光染料,最大激发/发射波长约为749/776 nm,具有良好的水溶性和生物相容性。
物理化学特性:
该标记产物呈深蓝色至近黑色溶液(水或缓冲液中),在近红外区有强荧光信号,光稳定性优于传统可见光染料。其分子量因谷蛋白聚合度不同而变化较大(通常为数十万至数百万道尔顿),但CY7的引入一般不影响谷蛋白的整体构象和溶解性(在适当pH条件下)。标记效率可通过紫外-可见分光光度法或荧光光谱定量评估。
功能应用与实验用途:
CY7标记小麦谷蛋白广泛用于食品科学、过敏原追踪及生物成像研究。例如,在消化模拟实验中,可实时监测谷蛋白在胃肠环境中的降解路径;在细胞摄取实验中,用于可视化谷蛋白片段是否穿透肠上皮屏障,辅助乳糜泻机制研究。此外,在微流控芯片或凝胶电泳中,CY7荧光便于无损检测谷蛋白迁移行为。
制备特点:
制备过程通常采用NHS酯活化CY7与谷蛋白表面赖氨酸残基反应,在pH 8.0–9.0缓冲体系中进行,需控制摩尔比以避免过度标记导致蛋白聚集。纯化常通过凝胶过滤层析去除未结合染料。
扩展开发方向:
未来可用于构建近红外荧光探针平台,结合靶向配体实现特定肠道受体识别,或集成于智能包装材料中,用于食品新鲜度与成分溯源传感。其低背景干扰特性亦适用于活体小动物成像,拓展至营养代谢动力学研究领域。
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