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2025年12月16日 11:13 来源:
FITC-肌醇,中文全称为异硫氰酸荧光素标记的肌醇,英文名为 FITC-labeled Inositol。它是一种关键的生物化学探针,由肌醇分子与荧光染料异硫氰酸荧光素(FITC)通过共价键连接而成。其核心价值在于,它让原本“不可见”的肌醇及其衍生物在生命活动中变得“可见”。
化学结构与特性
从结构上看,FITC-肌醇是肌醇(一种六碳糖醇,环己六醇)的某个羟基被FITC衍生物取代的产物。FITC是一种经典的绿色荧光基团,其最大激发/发射波长约为495 nm / 519 nm。这一修饰赋予了肌醇分子两个关键物理化学特性:一是强荧光性,可在特定激光激发下发出稳定绿光;二是其分子极性、空间位阻和分子量相较于游离肌醇发生显著改变,这在层析分离分析中至关重要。
功能应用与实验细节
FITC-肌醇的核心功能是作为示踪剂,用于研究肌醇磷脂信号通路。细胞生命活动依赖于信号传导,其中肌醇磷脂(如PIP2)的水解会产生肌醇三磷酸(IP3)等第二信使。
在实验中,研究人员将FITC-肌醇导入活细胞,细胞内的激酶会将其磷酸化,生成FITC标记的肌醇磷脂(如FITC-PIP2)。当细胞受体被激活时,磷脂酶C(PLC)会切割FITC-PIP2,产生可溶性的FITC-IP3和膜结合的DAG。
随后,通过高效液相色谱(HPLC) 或薄层色谱(TLC) 等技术进行结构层析分离。FITC的强荧光特性使得极微量的标记产物(通常在皮摩尔级别)也能被高灵敏度荧光检测器轻易检测和定量。通过分析不同时间点细胞提取物中FITC-IP3、FITC-PIP2等各组分的峰面积变化,科研人员能够动态、定量地描绘出信号通路的激活强度与时效关系,这是使用放射性同位素(如³H-肌醇)传统方法之外更安全、便捷的选择。
开发与延伸领域
该探针的开发极大地推动了非放射性信号通路研究。当前,其应用已扩展到药物筛选领域,通过监测药物对FITC标记的肌醇磷脂代谢的影响,来筛选调控该通路的候选药物。此外,在植物生理学中,它也被用于研究植物激素脱落酸(ABA)信号转导等过程,展示了跨领域的强大工具价值。
新维创生物科技(重庆)有限公司
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