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Cy3-TCO(花菁染料CY3反式环辛烯)的物理性质与光学特性

2025年03月17日 11:17 来源:http://www.xwcbio.com/

Cy3-TCO(花菁染料CY3反式环辛烯)的物理性质与光学特性

中文名称:花菁染料CY3反式环辛烯
英文名称:Cy3-Trans-Cyclooctene(Cy3-TCO)

一、基础物理性质

外观与剂型

冻干粉末:呈橙红色疏松状固体,复溶后溶液呈澄清透明橙红色,无可见沉淀。

溶解性:易溶于二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或含5%吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBS),溶解度>10 mM。

光谱特性

荧光参数:Cy3的最大吸收波长550 nm,发射波长570 nm,消光系数(ε)为150,000 M⁻¹cm⁻¹,量子产率约0.15。

双光子特性:在880 nm飞秒激光激发下,可产生440 nm二次谐波信号,适用于深部组织成像。

分子结构与尺寸

TCO基团:反式环辛烯为8元环结构,环张力赋予其与四嗪(Tetrazine)的高反应活性(速率常数≈800 M⁻¹s⁻¹)。

连接臂设计:Cy3通过聚乙二醇(PEG4)间隔臂与TCO连接,总分子量约820 Da,减少空间位阻。

稳定性与储存

光稳定性:在持续光照下(功率密度10 mW/cm²),荧光半衰期约1500秒,优于有机荧光蛋白。

储存条件:4℃避光保存稳定6个月,-80℃可延长至2年;避免反复冻融。

二、光学特性分析

荧光各向异性

旋转特性:Cy3-TCO的荧光各向异性值(r)约为0.28,反映其在溶液中的中等分子量与较快旋转。

pH敏感性

荧光强度:在pH 5-9范围内稳定,极端pH(<4或>10)导致荧光强度下降约30%。

胶体行为

粒径分布:动态光散射(DLS)显示Cy3-TCO水合粒径约1.2-1.5 nm(未聚集状态)。

表面电荷

Zeta电位:在生理条件下(pH 7.4)带负电(-10至-20 mV),可通过静电作用与阳离子聚合物结合。

三、物理表征方法

核磁共振(NMR):验证TCO的环结构完整性(特征峰δ=5.5-6.0 ppm)。

质谱分析:确认分子量(理论值820.3 Da),误差<0.1%。

荧光寿命成像(FLIM):测量Cy3荧光寿命约1.8 ns,区分背景自发荧光。


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