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2025年03月17日 11:17 来源:http://www.xwcbio.com/
中文名称:花菁染料CY3反式环辛烯
英文名称:Cy3-Trans-Cyclooctene(Cy3-TCO)
外观与剂型
冻干粉末:呈橙红色疏松状固体,复溶后溶液呈澄清透明橙红色,无可见沉淀。
溶解性:易溶于二甲基亚砜(DMSO)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或含5%吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBS),溶解度>10 mM。
光谱特性
荧光参数:Cy3的最大吸收波长550 nm,发射波长570 nm,消光系数(ε)为150,000 M⁻¹cm⁻¹,量子产率约0.15。
双光子特性:在880 nm飞秒激光激发下,可产生440 nm二次谐波信号,适用于深部组织成像。
分子结构与尺寸
TCO基团:反式环辛烯为8元环结构,环张力赋予其与四嗪(Tetrazine)的高反应活性(速率常数≈800 M⁻¹s⁻¹)。
连接臂设计:Cy3通过聚乙二醇(PEG4)间隔臂与TCO连接,总分子量约820 Da,减少空间位阻。
稳定性与储存
光稳定性:在持续光照下(功率密度10 mW/cm²),荧光半衰期约1500秒,优于有机荧光蛋白。
储存条件:4℃避光保存稳定6个月,-80℃可延长至2年;避免反复冻融。
荧光各向异性
旋转特性:Cy3-TCO的荧光各向异性值(r)约为0.28,反映其在溶液中的中等分子量与较快旋转。
pH敏感性
荧光强度:在pH 5-9范围内稳定,极端pH(<4或>10)导致荧光强度下降约30%。
胶体行为
粒径分布:动态光散射(DLS)显示Cy3-TCO水合粒径约1.2-1.5 nm(未聚集状态)。
表面电荷
Zeta电位:在生理条件下(pH 7.4)带负电(-10至-20 mV),可通过静电作用与阳离子聚合物结合。
核磁共振(NMR):验证TCO的环结构完整性(特征峰δ=5.5-6.0 ppm)。
质谱分析:确认分子量(理论值820.3 Da),误差<0.1%。
荧光寿命成像(FLIM):测量Cy3荧光寿命约1.8 ns,区分背景自发荧光。
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