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2026年01月06日 13:48 来源：
中文名称：FITC标记外囊泡
英文名称：FITC标记EVs
外囊泡（Extracellular Vesicles，EVs）是细胞主动分泌的磷脂双层膜包裹的纳米级囊泡，直径30-1000 nm，根据生物起源分为外泌体（Exosomes，40-160 nm）、微囊泡（Microvesicles，50-1000 nm）和凋亡小体（Apoptotic Bodies，50-5000 nm）。其核心属性为携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性分子，作为细胞间通讯的“信使”，参与生理调控与疾病进程。
FITC标记原理与化学结构
FITC（Fluorescein Isothiocyanate，异硫氰酸荧光素）是一种绿色荧光染料，其异硫氰酸基团可与EVs膜表面蛋白的氨基（-NH₂）共价结合，形成稳定的硫脲键。标记后EVs保留原有生物活性，同时赋予荧光特性，便于通过激光共聚焦显微镜（LSCM）或流式细胞术追踪其动态分布。
功能与应用
1. 疾病诊断：EVs表面标志物（如CD9、CD63、GPC-1）与肿瘤、神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）相关。FITC标记可实现EVs的实时可视化，例如在乳腺癌模型中，FITC-EVs通过血液循环靶向肿瘤组织，结合免疫荧光技术可定量分析肿瘤转移风险。
2. 药物递送：EVs作为天然载体，可包裹化疗药物（如阿霉素）或基因编辑工具（如siRNA）。FITC标记用于监测药物递送效率，例如在心肌缺血模型中，FITC-EVs携带的miR-126通过靶向内皮细胞促进血管新生。
3. 免疫调节：间充质干细胞来源的EVs通过FITC标记，揭示其抑制T细胞增殖的机制，为自身免疫疾病（如类风湿关节炎）治疗提供新策略。
实验细节
1. 标记流程：分离纯化EVs后，加入FITC溶液（终浓度5-10 μM），4℃避光孵育1小时，通过超速离心（100,000×g，2小时）去除未结合染料。
2. 验证方法：使用流式细胞术检测FITC荧光强度，透射电镜（TEM）观察EVs形态，Western blot确认表面标志物（如CD63）表达。
3. 应用案例：在肝癌模型中，FITC-EVs携带的PD-L1抗体通过靶向肿瘤相关巨噬细胞（TAMs），抑制免疫逃逸，显著延长小鼠生存期。
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