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2026年01月06日 13:45 来源：
CY3-布鲁氏菌（CY3-Brucella）并非单一化合物，而是将Cy3荧光染料（C30H37N3O2S2，λex≈550 nm，λem≈570 nm）通过NHS酯或马来酰亚胺化学偶联至布鲁氏菌表面脂多糖（LPS）或外膜蛋白25（Omp25）的标记产物。其结构层析可简化为：①疏水性的多甲川菁核嵌入LPS的脂质A区；②亲水的磺酸基伸出菌膜，形成“荧光外壳”；③共价键确保在强氧化或脲酶阳性条件下仍保持标记稳定。
物理化学特性：标记后菌体仍保持0.5–1.5 µm球杆菌形态，革兰阴性，无芽孢；Cy3赋予其橙红色荧光，量子产率≈0.15，光漂白半衰期约180 s（PBS，25°C）。zeta电位由–35 mV升至–22 mV，表明染料降低了表面负电荷，但不妨碍胞内存活。
产品/功能应用：商业试剂盒已将CY3-布鲁氏菌制成“活菌示踪粒子”，用于：1）Real-Time PCR内标——与VIC/FAM双探针并行，判别疫苗株A19或S2的SNP位点（bab1-1763、Bss2_I1636），灵敏度达10 copies/µL；2）细胞感染动态成像——以MOI 400:1感染BHK-21，可在共聚焦显微镜下实时观察BCV（Brucella-containing vacuole）形成，追踪感染后0–48 h的胞内复制曲线；3）疫苗载体前体——Cy3定位信号帮助优化减毒骨架，构建表达SOD、L7/L12融合蛋白的重组疫苗，诱导Th1型IFN-γ应答，比传统A19株提高1.4倍。
实验反应示例：将CY3-布鲁氏菌与羟基氯喹（10 µM）共孵育，荧光淬灭率≥60%，提示药物可破坏菌膜完整性；而在pH 4.5的酸化吞噬体模拟液中，荧光强度仅下降8%，证实其耐酸适合胞内示踪。
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