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2025年12月09日 11:03 来源:
CY2-NHS,中文名称为CY2-琥珀酰亚胺酯,是一种具有高度反应活性的荧光标记试剂。其英文全称为Cyanine2 N-hydroxysuccinimide ester,属于花青素(Cyanine)染料家族的重要衍生物。该化合物在生物化学和分子生物学领域常被简称为Cy2-NHS ester。
CY2-NHS的核心结构由三部分组成:
花青素发色团:由两个氮杂环通过聚甲炔链连接形成的共轭体系,这是其荧光特性的基础。
反应性琥珀酰亚胺酯基团(-NHS):能够与伯氨基(-NH2)发生特异性反应
磺酸基团:增加水溶性和减少与生物分子的非特异性结合
这种巧妙的结构设计使其分子量约为423.5 g/mol,分子式为C₂₃H₂₅N₃O₆S。
荧光特性:CY2-NHS的最大激发波长约为492 nm,最大发射波长约为510 nm,呈现明亮的绿色荧光。其荧光量子产率高,光稳定性好,适合长时间观察。
溶解性:由于磺酸基团的存在,CY2-NHS在水和多种有机溶剂(如DMF、DMSO)中均有良好的溶解性。
反应特性:琥珀酰亚胺酯基团在pH 7.5-9.0的缓冲条件下,能够与蛋白质、多肽或其他含伯氨基的生物分子高效反应,形成稳定的酰胺键。
稳定性:固态CY2-NHS在干燥、避光、-20°C条件下可长期保存;但溶液状态对水分敏感,需现配现用。
蛋白质标记与检测:CY2-NHS广泛用于Western blot、免疫荧光等蛋白质检测技术中。标记后的抗体或蛋白质可在荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜下被特异性检测。
细胞成像:通过标记细胞表面或内部的特定蛋白质,CY2-NHS可用于活细胞或固定细胞的荧光成像研究,帮助科学家观察蛋白质定位、表达水平及动态变化。
生物分子相互作用研究:在蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸相互作用研究中,CY2-NHS标记提供了一种高灵敏度、低背景的检测手段。
多重检测应用:由于CY2的发射光谱与其他花青素染料(如CY3、CY5)有良好区分,可实现多重荧光标记和同时检测,提高实验效率。
流式细胞术:在流式细胞分析中,CY2-NHS标记的抗体可用于细胞表面标志物的检测和细胞分群。
CY2-NHS的发展代表了生物标记技术的重要进步,其优异的化学特性和广泛的应用范围使其成为现代生命科学研究中不可或缺的工具。随着成像技术的不断发展,这类荧光标记试剂的重要性将进一步凸显。
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