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2024年01月04日 14:06 来源：新维创生物科技（重庆）有限公司
1、将保存在硫酸胺中的PE(5mg，约1.8mL)。充分摇匀后，取0.9mL，12000r/min离心10min，弃上清。将沉淀重悬于0.5mlPBS中。在300MLPBS中室温透析30Min。期间换液俩次。
2、调整PE浓度为1.4mg/ml，加入40μL SPDP，浓度1.3mg/ml in甲醇，室温孵育2.5h。
3、取纯化CD4抗体200μL(25mg/ml)加入40μL SMCC(1.7mg/ml in DMSO)，室温孵育1h。
4、将75μL DTT加到SPDP-PE中，室温孵育30Min。
5、用PD-10柱纯化SPDP-PE-DTT和SMCC-CD4单抗，并将其混合，4℃搅拌过夜。
6、在过夜的标记混合物种加入NEM 160μL (12.5mg/ml,PBS溶解)终止反应，4℃继续搅拌30min。
7、将标记抗体通过S-300柱在AKTA检测下分离纯化，PBS洗脱，收集第一峰。
8、收集的标记抗体加入终浓度1%BSA，0.1%防腐剂，1mmol/L碘乙酰胺，0.1mmol/L EDTA，4℃保存。
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