一、产品基础信息

• 中文名称：棕榈油酸-CY2

• 英文名称：Palmitoleic acid-CY2（cis-9-Hexadecenoic acid-CY2）

• 常用缩写/别名：顺-9-十六碳烯酸CY2标记物、棕榈油酸荧光探针、POA-CY2

• 规格：10mg/100mg/500mg

• 溶剂：建议先用少量无水 DMSO、DMF 或乙醇溶解，再用缓冲液稀释

• 性状：黄色至橙黄色粉末或蜡状固体（示意，具体以 COA 为准）

二、作用原理

棕榈油酸是十六个碳的直链羧酸，在第九与第十个碳之间有一个顺式双键。这个双键的分量不轻：它使碳链在中间出现一个约三十度的弯折，链无法像饱和脂肪酸那样规整排列，堆积密度下降，相变温度也随之降到零度附近。常温下它是液体，这一点直接决定了它在体系中的行为。

羧基的一端是分子的化学入口。它的解离常数在 4.8 上下，中性水相中基本以阴离子形式存在，带一个负电荷。这条通路也意味着：一旦羧基被用于偶联，分子的负电荷就消失了。标记物的净电荷状态与未标记的脂肪酸不同，这在解读分配数据时必须纳入考虑。

另需注意的是它在水相中的聚集行为。单不饱和脂肪酸在水中的临界聚集浓度很低，分子会自发形成胶束或囊泡状结构，而不是以单体形式分散。标记之后这个性质并不消失，只是聚集体的尺寸与表面电荷因染料与连接臂的存在而改变。由此产生一个读图上的偏差：荧光信号反映的是聚集体内部的染料浓度，而不是体系中游离单体的浓度。把信号当作浓度的直接量度，结论容易偏。

染料的接入还带来第二个影响。CY2 是结构紧凑的花菁染料，两个吲哚环之间只隔一条三甲川链，体积小于 CY3 与 CY5。短波段的优势是单分子亮度较高、检测器效率好；代价是这一波段的样本自发荧光与散射都更强，含脂质较多的体系尤其明显。

三、操作要点

母液配好后按单次用量分装。 棕榈油酸部分在低温下容易析出或成蜡状，反复冻融会加剧这一过程。分装后一次解冻一管，用完即弃。

稀释时保持助溶剂比例一致。 脂肪酸在水中自组装，助溶剂比例改变会直接改变聚集体的形态与信号强度。同一组实验内，各样本的有机溶剂终浓度应保持一致，建议控制在 1% 以内。

工作液浓度控制在聚集转折点以下。 建议先跑一条浓度与强度的曲线，找出信号开始偏离线性的位置，实际工作浓度取在该位置之前。曲线的形状本身就是聚集行为的信息，应予记录。

避光并减少氧暴露。 顺式双键对氧化的敏感性高于饱和链，光照与金属离子会加速过氧化。母液避光保存，缓冲液中若含过渡金属离子，可先经螯合树脂处理。

过滤时注意吸附损失。 疏水分子在滤膜上的吸附不可忽略，低浓度溶液尤为明显。需要除菌时优先选低蛋白结合型滤膜，并在过滤前后各测一次信号，确认损失比例。

四、常见避坑

把聚集导致的信号下降当成染料脱落。 浓度升高后自组装加剧，染料间距缩短，自淬灭出现，信号不再随浓度增长。判断方法是测定吸收光谱：若主峰位置与峰形未变，只是强度变化，说明分子完整，问题在聚集；若出现新的吸收峰或峰位明显偏移，才需考虑结构变化。

忽略双键过氧化的累积效应。 过氧化产物会破坏共轭体系，表现为短波段出现异常吸收、荧光逐渐下降。这类变化在早期不易察觉，建议对同一批工作液在不同时间点做光谱记录，看出趋势。

用短波通道做厚样本。 CY2 的激发与发射位于蓝绿区，这一区段的自发荧光与散射都强，厚样本中的信号容易被背景淹没。样本较厚时，改用橙红或远红通道更为合适。

在含钙或含镁的缓冲液中久置。 二价阳离子会与游离羧基形成络合物，改变聚集体的表面电荷与尺寸。虽然标记物的羧基已用于偶联，连接臂上若保留可解离基团，同样会受影响。缓冲液宜选磷酸盐或有机缓冲体系，现配现用。

五、Q&A

Q：这个标记物为什么在缓冲液里容易呈乳光？

A：脂肪酸在水中会自发形成胶束或囊泡，尺寸接近可见光波长时表现为乳光。这是自组装的结果，不是变质。降低浓度、提高助溶剂比例、短时超声都可以减轻，但会同时改变聚集状态，需在数据解释时说明。

Q：荧光强度能不能直接换算成脂肪酸浓度？

A：不宜直接换算。信号强度受聚集状态、染料间距、微环境影响，与浓度之间只在低浓度区间近似线性。定量时应使用同批工作液、同一助溶剂比例，并在转折点以下测量。

Q：羧基被偶联之后，分子的电荷状态有什么变化？

A：未标记的棕榈油酸在中性水相中带一个负电荷，羧基被占用后这一负电荷消失，标记物的净电荷取决于染料与连接臂上的可解离基团。做电荷相关实验时，这一差异会直接影响分配与迁移行为。

Q：短波通道在多色实验中需要注意什么？

A：CY2 的激发发射位置与荧光素类接近，光谱重叠明显，两者不宜在同一组样本中同时使用。与 CY3 之间的间隔足够，双标可行。排通道时应先查交叉，再定采集参数。

本产品仅供科研使用，禁止用于任何人体实验。

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