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2026年11月05日 16:39 来源：https://xwcbio.com/index.php?id=343
Q1：反应窗口怎么定？
仅供科研。马来酰亚胺与游离巯基在近中性条件下加成，生成硫醚键；pH 6.5–7.5 选择性好，高于 8.5 时与伯胺的副反应和水解增多。激发/发射峰约 650/670 nm，配 647 nm 激发与 Cy5 或 APC 滤片。
Q2：底物前处理要注意什么？
仅供科研。底物若无游离巯基，可先用 DTT 或 TCEP 还原二硫键，加染料前用脱盐柱除净还原剂，否则还原剂会抢占反应位点、偶联失败。缓冲液不宜含硫醇类添加剂，pH 维持 6.5–7.5，室温避光反应 1–2 小时。
Q3：储存与淬灭如何处理？
仅供科研。干粉 −20 ℃ 干燥避光保存，回温至室温再开盖。母液用无水 DMSO 现配，久置活性下降；普通型脂溶，水相体系宜选磺化型。反应结束时加半胱氨酸或硫脲淬灭过量染料，再经脱盐除去游离染料。
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