关注我们，为您提供时实资讯
2026年11月05日 11:38 来源：
两者无法直接连接，需在中间引入连接臂。烟酸是吡啶-3-甲酸，生物素的有效位点在戊酸侧链，两者均为羧基，羧基之间不会自发成键。因此标记需在中间设一段带氨基的桥——常用乙二胺或己二胺，一端接烟酸，一端接生物素，将两个分子连接起来。
理解这一点后，烟酸-生物素（Nicotinic acid-Biotin）的各项操作要求即可相应理解。
常见的误解，是将两种看似可反应的物质直接混合即认为反应完成。
羧基的化学性质决定了它需要反应对象。对象可以是氨基（缩合成酰胺），可以是羟基（成酯），也可以是经还原得到的醛。但两个羧基相遇时，双方都难以充当被进攻的一方，反应不易发生。
这就是活化处理的意义——先用碳二亚胺类试剂将羧基转化为活性酯，提高其反应活性，再与氨基形成酰胺键。
因此头一步并非直接连接两个分子，而是先在其中一个分子上引入氨基。
做法有两种，思路一致，步骤相反。
其一，先使二胺与烟酸的活化羧基反应。二胺分子两端均为氨基，一端被消耗，另一端保留，形成烟酸一侧的游离伯胺。此时再加入生物素的活化酯，与该游离氨基形成酰胺键。
其二，先制备生物素-乙二胺，得到带游离氨基的生物素衍生物，再与烟酸的活化羧基对接。
两条路殊途同归，区别在于哪一步的副产物更好除去。实际生产里选哪条，取决于物料价格与纯化难易，不影响使用。
接上之后，分子变成三段：烟酸的吡啶甲酸端、中间的短桥、生物素的咪唑啉酮端，各管一件事。
连接臂接好之后仍未结束，还需控制一个副反应。
若两种原料的活化形态同时存在，会发生同源反应——两个烟酸相连，或两个生物素相连。这类副产物的分子大小是目标产物的两倍上下，走凝胶过滤时会以前峰的形式冒出来。
该副产物不易察觉：外观相同、溶解性相近，未经柱层析或质谱分析，难以发现样品中混有少量同源二聚体。
控制方法有两个：将活化与偶联分为两步进行，中间除净活化剂；投料时使其中一方略过量，以抑制另一方的同源反应。自制偶联时收率往往略低于预期，即因部分物料转化为同源产物。
生物素与亲和素的结合较为牢固，依靠的是咪唑啉酮环上的氢键以及相邻的硫醚。硫醚是关键部位，也是较为脆弱的位置。
硫能被氧化成亚砜。氧化之后只多了一个氧，肉眼看不出来，溶解性也没大变，但它和亲和素的结合强度会掉几个数量级。
表现出来是捕获效率一次不如一次，洗脱时目标物提前跑掉，或者目标物未能被有效捕获。遇到这种情况，首先该想到换一个新批次做对照，而不是怀疑磁珠或缓冲液。
减少氧化的措施不复杂：避光、避高温、减少敞口时间，不与强氧化剂共同存放。含金属离子的缓冲液建议先经螯合树脂处理。
另一个容易被忽略的细节是桥的长度。
亲和素是分子尺寸较大的四聚体蛋白，靠近生物素时需要一定空间。桥过短时，亲和素会与烟酸端产生空间冲突，结合效率下降；桥过长时分子柔性增大，定位精度下降，信号位置不够锐利。
不同供应商提供的桥长不同，有采用乙二胺（两个碳）的，有采用己二胺（六个碳）的，也有采用更长 PEG 类连接臂的。做结合或定位类实验时，该参数需要关注。
具体间隔臂信息以随货 COA 为准。
关于该产品的桥长选项、生物素活性检测方法与应用场景，可参见新维创生物官网对应的技术文章与产品页。
本产品仅供科研使用，禁止用于任何人体实验。
点击链接，查看产品详情：烟酸-生物素
日期：2026-11-05
新维创科普 | 烟酸-生物素/Nicotinic acid-Biotin/维生素B3生物素化衍生物/吡啶甲酸亲和标记物/用于亲和捕获与定位研究的科研试剂
日期：2026-11-05
新维创科普 | 山梨醇-CY3/Sorbitol-CY3/山梨糖醇荧光探针/六元糖醇橙红标记物/用于糖醇分配与转运示踪的科研试剂
新维创生物科技（重庆）有限公司
2023.06.05
新维创生物科技（重庆）有限公司同位素产品系列上新
2026.07.06
Mannose-CY5甘露糖红色荧光标记多糖类化合物
2024.06.12
FITC-甘露糖Mannose-FITC异硫氰酸荧光素甘露糖荧光标记的优点
2024.05.28
DBCO-CY5与DBCO-CY7化学结构及性质差别/sulfo-cy5-dbco/sulfo-cy7-dbco
2024.05.27
DBCO-CY5荧光标记化合物点击化学反应的特性CY5-二苯并环辛炔2182601-71-2
2024.05.27
Cy5标记胆固醇在生物医学研究中具有广泛的应用领域醇Cholesterol-Cy5
2024.05.23
近红外荧光染料CY5标记胆固醇Cholesterol-Cy5针化合物
2024.05.23
Cholesterol-CY5胆固醇红色而荧光标记甾醇CY5羧基1032678-07-1
2024.05.23
新维创生物（重庆）有限公司 FITC-丝素蛋白绿色荧光标记，Silk fibroin,CAS:96690-41-4 ,Silk fibroin-FITC…
2024.05.18
重庆新维创生物 CY5-MAL马来酰亚胺的光学性质CY5红色荧光染料修饰1437796-65-0
2024.05.18
磺酸基CY5马来酰亚胺巯基反应性荧光染料Sulfo-CY5-MAL
2024.05.13
Sulfo-CY5-MAL︱2242791-82-6︱磺酸基团荧光染料衍生物在生物成像、化学分析的应用…
2024.05.13
阿霉素荧光修饰RB-Doxorubicin罗丹明标记阿霉素药物输送体内示踪
2024.05.11
赖氨酸FITC标记FITC-D-LYS荧光素标记赖氨酸绿色荧光异硫氰酸荧光素生物学应用…
2024.05.11
D-LYS-FITC荧光素标记赖氨酸 多肽标记绿色荧光异硫氰酸荧光素的应用
2024.05.11
FITC-D-LYS荧光素标记赖氨酸绿色荧光异硫氰酸荧光素修饰多肽
2024.05.11
CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的荧光特性1807529-70-9 Sulfo-CY5-amine磺酸基
2024.05.10
CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的化学性质近红外荧光染料CY5-NH2 1807529-70-9
2024.05.10
水溶性花菁染料Cy5标记链霉亲和素streptavidin
2023.11.24
水溶性CY5标记叠氮的原理
2023.11.24
荧光探针Sulfo-CY5-azide水溶性叠氮化物
2023.11.24
在氢谱中氨基为什么有两个峰？
2023.07.13
新维创生物汇总HNMR（核磁氢谱）化学位移0-14代表性官能团
2023.07.07
常用于核磁共振的氘代化学品
2023.07.03
NMR所需样品量和内标总结
2023.06.28
什么是核磁共振二维谱(2D NMR)？
2023.06.27
新维创生物利用核磁共振波谱仪分析聚合物结构
2023.06.27
你知道固体核磁和液体和磁的区别吗？
2023.06.20
