一、产品基础信息

• 中文名称：多聚赖氨酸-罗丹明

• 英文名称：PLL-RB（Poly-L-lysine-Rhodamine B）

• 常用缩写/别名：聚赖氨酸-罗丹明、PLL-RhB、罗丹明标记多聚赖氨酸

• 规格：10mg/100mg/500mg

• 溶剂：水、PBS 等常用缓冲液可直接溶解，必要时超声辅助

• 性状：红色至深红色冻干粉或絮状固体（示意，具体以COA为准）

二、作用原理

多聚赖氨酸是一条由几十到几百个赖氨酸残基连成的多肽，每个残基侧链末端是一个伯胺。这类伯胺的 pKa 在 10.5 上下，在 pH 7.4 的常规缓冲体系里绝大多数处于质子化状态，整条链因此带密集的正电。正电荷是它的主要功能基础：通过静电作用吸附到带负电的玻璃、氧化处理的塑料以及细胞膜表面，形成覆盖层并改变表面性质。

罗丹明 B 走红通道，吸收约 550 nm、发射约 570 nm，摩尔吸光系数大，单分子亮度在常用染料中处于较高水平，光稳定性中等偏上，适合较长时间的观察。

两者对接采用常规路线：罗丹明的 NHS 活性酯与侧链伯胺反应生成酰胺键，副产物 N-羟基琥珀酰亚胺可通过透析或超滤除去。反应本身不复杂，关键在于反应的量。

罗丹明分子之间存在一个容易被忽略的性质：两个罗丹明距离过近时会面对面叠成 H-型二聚体，吸收峰从 550 nm 蓝移至 520 nm 附近，同时荧光被削弱。这个距离门槛在 1 到 2 nm 量级，而多聚赖氨酸链上相邻伯胺的间距正好落在这个范围里。于是标记度升高时，单分子亮度并非线性增加，反而可能先升后降——取代越多，分子间距越小，亮度越低。

另一方面是电荷的影响。每接上一个染料即消耗一个伯胺，正电荷随之减少。罗丹明本身不带正电，接得多了，整条链的净正电荷下降，对负电表面的吸附能力同步减弱。因此不能只考虑荧光强度，需将信号与吸附能力同时权衡。

三、选型比较

同一条产品线下，实际使用中大致分为三档：

低标记度（每链 1 到 3 个染料）。 染料之间距离足够远，基本不形成二聚体，单分子亮度接近理论值。正电荷损失小，表面包被能力与未标记的聚赖氨酸接近。适合既要做包被、又要定位的场景，信号偏弱但可信。

中等标记度（每链 5 到 10 个）。 亮度与吸附能力取得折中，为多数示踪实验的常用区间。该区间已开始出现少量聚集体，光谱中 520 nm 处会出现小的肩峰，做定量比较时应使用同一批次、同一浓度。

高标记度（每链 10 个以上）。 亮度不再随标记度上升，甚至下降；正电荷被大量中和，吸附变弱，产物在水相中的溶解度也可能变差。除非特殊需要，一般不建议。

链长同样要参与选择。短链（聚合度低）位点少，标记度好控制，扩散快，铺展均匀；长链位点多，单个分子能带的染料多，吸附锚点多、附着牢固，但溶液黏度上升，浓度高时操作不便。若产品目录未标注聚合度，可按 COA 标示的标示量或黏度区间判断。

四、性能优势

信号与功能同位。 标记的是聚赖氨酸本身，不是另加一个示踪分子，看到的荧光位置就是聚赖氨酸所在的位置，不存在“标记物与功能分子分离”的问题。

通道独立。 罗丹明的红通道与 FITC 的绿通道、CY5 的远红通道间隔明显，做多色实验时与常用的绿色标记物并排使用，串色风险小。

不用二次显色。 直接读荧光即可，不用再加显色底物或二抗，步骤少、变量少。

水相直接可用。 与需要有机溶剂助溶的疏水染料不同，PLL-RB 在 PBS 中即可溶解，对体系的有机溶剂残留不敏感。

表面覆盖可查。 通过荧光强度或共聚焦截面的信号分布，可以判断包被是否均匀、是否存在漏点，比空白对照的间接推断直观。

五、Q&A

Q：为什么标记度高了，荧光反而变暗？

A：罗丹明近距离形成 H-型二聚体，吸收蓝移到 520 nm 附近，激发光吸收与发射都被压低，这叫自淬灭。判断方法是看吸收光谱里 520 nm 与 550 nm 的比值，该比值升高说明已发生聚集。

Q：可以自己控制标记度吗？

A：投料比是主要手段——提高染料活性酯对多肽的摩尔比，标记度上升，但这个关系在高投料比时会饱和。不同客户对标记度的要求不同，实际批次的标记度以随货 COA 标示为准。

Q：标记之后还能不能用来做表面包被？

A：可以，但包被效果会随标记度下降。每接一个染料少一个正电荷，低标记度的影响在可接受范围，高标记度需要提高包被浓度来补偿。

Q：溶解时出现少量不溶物怎么办？

A：先延长溶解时间并用移液器轻柔吹打，仍不溶可短时低功率超声。若残留絮状物，离心取上清或用 0.22 μm 滤膜过滤，过滤前后各测一次吸收，按回收率折算浓度。

Q：和荧光素标记的版本相比怎么选？

A：看检测通道与样本背景。绿色通道在多数样本里自发荧光较强，红通道背景更干净；若同时要用绿色标记另一种分子，选 PLL-RB 可以避开通道拥挤。

本产品仅供科研使用，禁止用于任何人体实验。

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