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2026年11月04日 10:26 来源:
中文名称:维生素B6-荧光素
英文名称:Vitamin B6-FITC
常用缩写/别名:VB6-FITC、吡哆醇-FITC、维生素B6-FITC
规格:10mg/100mg/500mg
溶剂:建议用 PBS 或弱碱性缓冲液助溶,必要时少量 DMSO 辅助
性状:黄色至橙黄色粉末或冻干粉(示意,具体以COA为准)
维生素B6 不是单一分子,而是一个小家族:吡哆醇带羟基、吡哆醛带醛基、吡哆胺带氨基,三者在体系中可以相互转化。这一点直接决定了标记路线怎么走——FITC 的异硫氰酸酯基只与伯胺反应,生成硫脲键。所以吡哆胺可以直连,而吡哆醇、吡哆醛本身没有伯胺,必须先引入氨基连接臂,或先做官能团转化。
标记之后,B6 端保留母核的识别特征,FITC 端提供绿色信号,于是原本看不见的摄取与分布变成了可以读出的荧光图像。
这里有一个 FITC 特有的性质需要放在前面考虑:它的荧光对 pH 相当敏感。硫脲键形成后,染料以两种质子化状态共存,酸性条件下荧光明显减弱,pKa 大约在 6.4 附近。也就是说,同一个样品在 pH 7.4 的缓冲液里亮,换到偏酸的介质里就暗下去——这不是分子降解,而是染料的质子化平衡在起作用。做定量比较时,各组 pH 需要对齐。具体形式与标记位点以 COA 为准。
通道通用:FITC 是使用范围很广的绿色染料之一,多数显微镜与流式配置都带对应通道。
亮度足够:消光系数与量子产率都不低,低标记度下也能得到可读信号。
结构保留:通过连接臂把染料与母核隔开,B6 的母核识别特征得以保留。
多色友好:与罗丹明、CY3(橙红)和 CY5(远红)可组成三色方案。
自带“探针”属性:pH 敏感性既是需要注意的变量,也可在严格控制下作为环境信息读出(示意,具体以COA为准)。
摄取与分布示踪:观察 B6 在细胞水平的摄取趋势与胞内分布。
形式比较:比较吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺三种形式标记后的行为差异。
多色共定位:与橙红、远红探针组合,判断空间关系。
pH 相关对照:在不同 pH 条件下读取信号,评价介质对荧光的影响。
方法学对照:以未标记 B6 为参照,评估标记对摄取行为的影响。
问:三种 B6 形式都能直接接 FITC 吗?
答:只有带伯胺的吡哆胺可以直连;吡哆醇与吡哆醛需要先引入氨基连接臂或做官能团转化,具体以 COA 为准。
问:为什么同一个样品换个缓冲液就变暗了?
答:FITC 的荧光对 pH 敏感,酸性条件下质子化形式比例上升、荧光下降,属于染料的固有性质,不是降解。
问:定量比较时要注意什么?
答:各组 pH、缓冲体系与曝光参数保持一致;上机前先测一遍样品的实际 pH。
问:FITC 和 CY5.5 版本怎么选?
答:看通道与样本厚度。绿色通道普及度高、操作方便;样本较厚时近红外通道背景更低。
问:工作液怎么配?
答:以 COA 标示量配制,弱碱性缓冲液助溶效果更好,配好后尽快使用。
问:保存要注意什么?
答:避光、低温、干燥保存;FITC 对光敏感,操作尽量在弱光下完成。
本产品仅供科研使用,禁止用于任何人体实验。
点击链接,查看产品详情:维生素B6-荧光素
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