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2026年10月24日 17:17 来源：https://www.xwcbio.com/index.php?c=index&a=search&kw=CY5-MAL
它更倾向结合巯基，选择性完成标记！这位近红外荧光捕手，帮你给蛋白打上荧光印记。 |
先说结论：
Cy5-MAL 是带有马来酰亚胺（MAL）活性基团的 Cy5 近红外荧光染料，在适宜条件下优先与巯基（-SH）发生反应，标记反应温和、荧光信号稳定，是蛋白、多肽、抗体巯基方向标记较为常用的近红外染料之一，可用于体内外荧光成像、流式、荧光示踪类实验。 |
Cy5-MAL 档案管理（靶向巯基，清晰显像）
Cy5 本身属于经典的花菁类近红外染料，吸收 / 发射波长在 650/670 nm 附近，属于近红外区间。 搭配 MAL（马来酰亚胺）基团之后，它有这几个明显特点：
反应偏好巯基 | 在中性偏弱酸（pH 6.5-7.5）环境中，MAL 基团更易和游离巯基反应；体系内氨基也有可能发生副反应，相比 NHS 酯标记，巯基标记更偏向定点修饰，对蛋白活性影响通常更小。 |
背景较低、组织穿透尚可 | 近红外波段受生物样本自发荧光干扰相对更少，组织穿透能力相较部分可见光染料更占优势，可用于体外孵育成像、细胞示踪、小动物活体成像等多种实验场景。 |
荧光表现较稳定 | 标记完成后的产物水溶性整体尚可；需要注意，染料处于溶液状态时建议避光保存，否则有出现荧光淬灭的风险。 |
适配样本范围 | 可尝试用于抗体、重组蛋白、肽、含游离巯基的小分子等样本标记。 |
它为你的实验能做些什么（给带巯基的生物分子 “打上荧光标签”）
场景一：标记抗体 / 蛋白，用于免疫荧光、Western 荧光检测、流式细胞分析；
场景二：标记多肽，追踪多肽在细胞内的转运、分布；
场景三：制备荧光探针，用于体外结合实验、活体荧光成像；
场景四：做双标 / 多标实验，和其他波段荧光染料搭配，实现多通道共定位。
新维创提示：MAL 基团优先倾向巯基反应，但并非完全不与氨基作用；如果你的实验目标主要修饰氨基，优先考虑 Cy5-NHS 会更适配需求
问有所答
Q1：反应 pH 怎么选？能不能在 pH8 以上标记？
A：MAL 与巯基的较适宜反应 pH 区间为 6.5-7.5。当 pH＞8 时，马来酰亚胺基团容易发生水解，会大概率降低和巯基的反应效率；pH 过低时，巯基易发生质子化，同样不利于反应进行。同时高 pH 环境还会提升 MAL 和氨基发生副反应的概率，实验中建议尽量规避。
Q2：DTT、β- 巯基乙醇可以放在反应体系里吗？
A：不建议添加。DTT、β-巯基乙醇本身带有巯基，会竞争性消耗 Cy5-MAL，容易造成标记效果变差。开展标记前，建议尽量去除样本体系内的还原剂。
Q3：标记完之后，未反应的游离染料怎么去掉？
A：一般用脱盐柱、透析或者凝胶过滤纯化，除去多余游离染料，降低背景荧光。
Q4：Cy5-MAL 能直接溶于水吗？
A：常规 Cy5-MAL 直接水溶性一般，通常可以先用 DMSO 配置母液，再加入到水相反应体系中使用；母液建议分装、避光，-20℃条件下冻存，尽量减少反复冻融。
Q5：Cy5-MAL 能用来标记活细胞吗？
A：可尝试用于活细胞体系中外源蛋白、多肽的标记。但活细胞内部存在大量内源巯基、氨基，会带来一定非特异性反应风险；做活细胞标记时建议设置合适对照，结合自身实验条件优化使用浓度。
想进一步了解荧光染料、光谱参数与储存规范,可查看新维创生物官网对应的技术文章或产品页,获取更完整的资料。
本文内容仅供科研使用,禁止用于任何人体实验。
点击链接,查看产品详情:Cy5-NHS
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