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2026年10月17日 09:59 来源:
烟酸-CY2和FITC标记的烟酸有什么差别?主要差别在荧光基团,CY2与常规绿色通道兼容,且对pH变化相对不敏感。本文从选型、结构、应用和保存展开。
CY2(Cyanine2)和FITC都属于绿色荧光染料,吸收峰和发射峰相近,分别在约488 nm和520 nm附近。两者都可与常规荧光显微镜、流式细胞仪和荧光酶标仪的绿色通道配合使用。
但两者在部分性质上存在差异。CY2属于花青素类染料,对pH变化的灵敏度相对较低;FITC属于荧光素类染料,荧光强度对pH较为敏感,在酸性环境中信号可能下降。因此,如果实验体系的pH波动较大,或者需要较宽pH范围内的稳定信号,CY2可作为FITC的替代选择。
烟酸-CY2(Nicotinic acid-CY2,维生素B3-CY2)正是将烟酸与CY2共价偶联的荧光标记探针。
烟酸(Nicotinic acid)是吡啶-3-羧酸,属于水溶性维生素B3的一种形式。烟酸分子含有羧基,可通过化学修饰引入活性基团,用于与荧光染料进行偶联。
烟酸经氨基化修饰后,与CY2的NHS酯发生亲核取代反应,生成酰胺键(-CO-NH-)。酰胺键在常规实验条件下较稳定,有助于减少染料在细胞培养及体外研究体系中的脱落。偶联后,探针在保留烟酸主要结构特征的同时,具备CY2的绿色荧光信号。
烟酸-CY2适用于以下科研场景:
1.烟酸细胞摄取与转运研究:利用CY2绿色荧光信号,在细胞水平监测烟酸进入细胞的动力学过程,分析其摄取速率和转运特征。
2.烟酸组织分布研究:用于组织样本中烟酸分布的分析,观察其在各组织中的蓄积行为。
3.维生素摄取机制研究:作为水溶性维生素荧光标记工具,研究烟酸与其他维生素或代谢物在摄取过程中的相互作用。
4.小分子荧光探针方法学开发:作为水溶性小分子荧光标记的方法学参考。
该探针可溶于DMSO、DMF,微溶于水、PBS缓冲液。建议先配母液,再稀释至工作浓度。
1.使用前将产品从低温环境取出,待恢复至室温后再开盖称量或溶解,减少冷凝水进入。
2.推荐使用无水DMSO配制母液,浓度可根据实验需求调整,通常为1-10 mM。
3.工作液建议现配现用,减少室温放置时间。
4.稀释时建议使用PBS或适当培养基,不建议使用含氨基的缓冲液,如Tris缓冲液。
5.荧光检测时,激发波长可设置为488 nm,发射波长收集范围可为500-540 nm。
Q:偶联位点在哪?
烟酸经氨基化修饰后引入的氨基与CY2的NHS酯反应,形成酰胺键。偶联位点经过设计,尽量保留烟酸的主要结构特征。
Q:能否用于活细胞成像?
可以。CY2的绿色荧光信号在活细胞中可检测,适用于活细胞孵育后的荧光显微镜和共聚焦成像。
Q:溶解性不佳怎么办?
建议优先使用DMSO或DMF配制母液。可将DMSO母液以不超过1%的终浓度稀释至PBS或培养基中。
Q:如何保存?
-20℃密封、干燥、避光保存。母液建议分装冻存,减少反复冻融。具体保存条件以随货COA为准。
本产品仅供科研使用,禁止用于任何人体实验。
点击链接,查看产品详情:烟酸-CY2
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