间羟基苯丙酸-FITC（3-(3-Hydroxyphenyl)propanoic acid-FITC，HPBA-FITC）是一种将酚酸类代谢物与FITC荧光染料共价偶联的荧光标记探针。本文介绍其结构组成、作用原理、核心优势、主要应用场景、储存使用规范及常见问题，供科研人员选型参考。

 一、产品基础信息与结构

1.1 中文名、英文名与常用写法

- 中文全称：3-(3-羟基苯基)丙酸-异硫氰酸荧光素

- 英文名称：3-(3-Hydroxyphenyl)propanoic acid-FITC

- 常用缩写：3-HPBA-FITC、HPBA-FITC

- 通用别名：间羟基苯丙酸-FITC荧光探针、HPBA-FITC荧光标记试剂、异硫氰酸荧光素-间羟基苯丙酸偶联物、酚酸类代谢物荧光示踪探针

1.2 基础理化参数

-外观性状：黄色至橙黄色粉末

- 分子量：约555.55（HPBA 166.17 + FITC 389.38，扣除反应脱去基团）

- 纯度：≥95%（HPLC）

- 常用规格：5 mg、10 mg、25 mg、50 mg、100 mg（支持定制）

- 保质期：12个月（-20℃密封、干燥、避光保存）

- 溶解性：可溶于DMSO、DMF、无水乙醇，微溶于水、PBS缓冲液

1.3 结构组成

本产品由三个功能单元组成：

A. 3-(3-羟基苯基)丙酸单元  

间羟基苯丙酸是肠道微生物代谢多酚类化合物产生的酚酸类代谢物之一，常作为微生物-宿主共代谢及多酚代谢通路研究的科研对象。该单元作为目标小分子模块，用于模拟和研究该类代谢物在科研体系中的分布与行为。

B. FITC荧光报告单元  

异硫氰酸荧光素（FITC）是常用的绿色荧光标记基团，吸收峰约495 nm，发射峰约520 nm。其异硫氰酸基团（-N=C=S）可与含氨基分子发生亲核加成反应，形成硫脲共价键，从而赋予目标分子荧光信号。

C. 硫脲共价桥接单元  

FITC的异硫氰酸基团与间羟基苯丙酸经氨基化修饰后引入的氨基反应，形成硫脲键（-NH-CS-NH-）。该共价键在常规实验条件下较稳定，有助于减少染料脱落，使荧光信号与目标小分子的行为保持较好一致性。

二、分子结构核心逻辑与作用原理

本产品采用“目标小分子模块 + 硫脲共价桥接 + FITC荧光报告”的模块化设计。间羟基苯丙酸单元提供目标小分子的结构特征，FITC单元提供绿色荧光信号，硫脲键将两者共价连接。

其作用原理为：FITC的异硫氰酸基团与间羟基苯丙酸经氨基化修饰后引入的氨基发生亲核加成反应，生成硫脲键。偶联后，探针在保留间羟基苯丙酸主要结构特征的同时，具备FITC的绿色荧光信号。研究者可利用该荧光信号，在细胞、组织或体外模型中对目标小分子进行示踪、分布和摄取研究。

该设计适用于缺乏直接检测手段的酚酸类小分子研究，为微生物代谢产物与宿主互作、多酚代谢通路等科研方向提供荧光示踪工具。

三、核心产品优势

1. 共价偶联，结构明确  

目标小分子与FITC通过硫脲键共价连接，偶联位点经过设计，尽量远离酚羟基和羧基等结构区域，以保留间羟基苯丙酸的主要结构特征。

2. 绿色荧光信号与常规FITC通道兼容  

FITC的吸收峰约495 nm，发射峰约520 nm，可与常规荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪和荧光酶标仪的FITC通道配合使用，便于不同实验平台读取信号。

3. 硫脲键在常规实验条件下较稳定  

共价连接方式有助于减少染料在细胞培养、组织孵育及体内研究等体系中的脱落，使荧光信号与目标小分子的分布行为保持较好对应。

4. 模块化设计，适配多种科研场景  

该探针可用于细胞摄取、亚细胞定位、组织分布、体外屏障模型通透性及代谢通路示踪等研究。模块化结构也支持根据实验需求进行标记比例调整或荧光基团替换。

四、主要应用场景

1. 肠道微生物代谢产物科研示踪与分布研究  

间羟基苯丙酸是肠道微生物代谢多酚类化合物产生的酚酸类代谢物之一。使用本探针可通过荧光成像或组织切片荧光观察，研究该代谢物在科研体系中的分布与蓄积行为，为微生物-宿主共代谢研究提供可视化工具。

2. 细胞摄取与亚细胞定位分析  

利用FITC绿色荧光信号，可在活细胞水平监测间羟基苯丙酸进入细胞的动力学过程，并通过共聚焦显微镜分析其在细胞质、细胞核或特定细胞器中的分布特征。

3. 体外细胞屏障模型通透性研究  

本探针可用于体外细胞屏障模型的通透性评价实验，观察目标小分子跨越细胞屏障的能力，为相关科研提供数据支持。

4. 多酚代谢通路与微生物-宿主共代谢研究  

在肠道微生物-宿主共代谢研究体系中，本探针可作为示踪标记物，用于追踪膳食多酚在肠道菌群作用下的代谢转化路径及其代谢产物在宿主组织中的分布。

5. 小分子荧光探针方法学开发  

本产品可作为酚酸类小分子荧光标记的方法学参考，用于建立和优化荧光标记、纯化、检测及成像条件。

五、储存与使用规范

储存条件：-20℃密封、干燥、避光保存。建议以DMSO或DMF配制母液后分装冻存，减少反复冻融。母液在-20℃避光条件下可保存3个月，-80℃条件下可延长至6个月。

使用注意事项：

- 使用前将产品从低温环境取出，待恢复至室温后再开盖称量或溶解，减少冷凝水进入。

- 推荐使用无水DMSO配制母液，浓度可根据实验需求调整，通常为1-10 mM。溶解后如有少量不溶物，可经0.22 μm滤膜过滤后使用。

- 工作液建议现配现用，减少室温放置时间，以降低荧光淬灭风险。

- 稀释时建议使用PBS或适当培养基，不建议使用含氨基的缓冲液（如Tris缓冲液），以减少与FITC异硫氰酸基团的非特异性反应。

- 荧光检测时，FITC通道激发波长可设置为488 nm，发射波长收集范围可为500-550 nm。

- 本产品仅供科研使用，不得用于非科研用途。

六、常见Q&A

Q1：该产品的偶联位点在哪里？是否会影响间羟基苯丙酸的结构特征？  

本产品通过FITC的异硫氰酸基团与间羟基苯丙酸经氨基化修饰后引入的氨基发生亲核加成反应，形成硫脲键。偶联位点经过设计，尽量远离酚羟基和羧基等结构区域，以保留间羟基苯丙酸的主要结构特征。建议在正式实验前进行功能验证。

Q2：该探针能否用于活细胞成像？  

可以。FITC的绿色荧光信号在活细胞中可检测，适用于活细胞孵育后的荧光显微镜和共聚焦成像。建议工作浓度参考1-10 μM，孵育时间根据实验体系优化，通常为15分钟至2小时。孵育结束后建议用PBS充分洗涤，以降低背景荧光。

Q3：该产品与常规FITC标记蛋白产品有何区别？  

常规FITC标记蛋白产品（如FITC-抗体、FITC-凝集素）的目标分子是蛋白质大分子，主要用于细胞表面标记或荧光检测。本产品的标记对象为小分子酚酸类代谢物，应用场景聚焦于代谢物示踪、微生物-宿主互作研究及小分子分布分析，两者在应用领域和实验设计上存在差异。

Q4：如何确认偶联反应成功？  

建议采用HPLC或LC-MS对偶联产物进行纯度分析和分子量确认，同时通过荧光光谱扫描验证产物的荧光峰是否与FITC特征一致。薄层色谱（TLC）也可作为快速定性判断的辅助手段。

Q5：产品溶解性不佳时如何处理？  

间羟基苯丙酸-FITC在水相中溶解度有限，建议优先使用DMSO或DMF配制母液。若实验体系要求水相环境，可将DMSO母液以不超过1%的终浓度稀释至PBS或培养基中，同时可通过轻微超声或37℃水浴辅助溶解。

Q6：产品如何保存？  

建议-20℃密封、干燥、避光保存，保质期12个月。母液建议分装冻存，减少反复冻融。具体保存条件以随货COA为准。

本产品仅供科研使用，禁止用于任何人体实验。

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