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2026年07月30日 13:52 来源:
分子基础特征与同位素标记原理
19:0 溶血磷脂酰胆碱-d5(19:0 Lyso PC-d5),也叫五氘代十九烷酰溶血卵磷脂,属于氘稳定同位素标记溶血磷脂分子,分子骨架和非标记 19:0 Lyso PC 高度一致,部分氢原子替换为重氢(氘,d5),分子理化性质、色谱保留行为与内源同类脂质几乎完全一致,但是质谱检测时拥有独特质量位移,能够和生物样本内源未标记脂质进行区分,是脂质组学十分重要工具分子。19:0 代表分子脂肪酸链为十九碳饱和脂肪酸链。
普通脂质组学检测时,生物样本本身含有内源溶血磷脂,很难区分哪些是外源添加分子,哪些是细胞内源生成分子。19:0 Lyso PC-d5 和天然分子理化行为高度接近,前处理过程当中损失程度和内源物质保持一致;质谱检测拥有特征质量偏移,依靠分子量差异,直接区分标记分子和内源分子。既可以作为定量内标校正样本前处理损失、仪器信号波动,也能够当作示踪底物,追踪外源脂质在生物体系内代谢转化路径。
第一用作脂质组学定量内标,加入样本当中,借助同位素稀释法,校正脂质提取、固相分离、上机检测全过程带来误差,提升溶血磷脂定量结果重复性;第二作为示踪底物,孵育细胞体系,追踪 19:0 Lyso PC 在胞内转运、转化代谢路径,解析溶血磷脂代谢通路;第三用于膜脂质转运蛋白研究,用来研究转运蛋白对长链饱和溶血磷脂识别转运特点;还可用于模式生物、植物、真菌脂质相关基础研究,搭建长链溶血磷脂动态检测体系。
氘代标记分子依然会在生物体系内参与代谢,长时间孵育实验需要关注同位素基团是否发生丢失;样本储存过程注意避免反复冻融,防止磷脂分子发生水解降解。内标添加时机十分关键,建议在样本提取之前加入体系,最大程度校正前处理损失。质谱方法需要提前优化离子采集参数,保障可以稳定识别 d5 特征质量峰。
声明:本文仅为科研试剂科普,该试剂仅限脂质组学、脂质代谢基础科研,定量方法开发需要结合自身仪器条件优化。
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