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2026年07月27日 14:12 来源:
一、脱氧尿嘧啶核苷 - CY5 基本定义
脱氧尿嘧啶核苷 - CY5,英文名称 Deoxyuridine-CY5,是将 CY5 荧光染料共价偶联至 2'- 脱氧尿嘧啶核苷得到的荧光核苷探针。脱氧尿嘧啶核苷是天然嘧啶核苷类似物,能够参与核酸合成相关生物学过程;CY5 作为远红外荧光基团通过化学连接臂与核苷碱基位点结合,在保留核苷生物学识别能力前提下赋予荧光信号,属于核酸生物学研究常用科研探针。
合成流程先对脱氧尿嘧啶核苷碱基侧链进行活化修饰,引入可交联官能团;活化 CY5 荧光染料通过碳链连接臂,与核苷发生偶联反应。连接臂起到空间隔离作用,降低荧光基团对核苷与聚合酶、核酸链相互作用的干扰。反应完成后使用高效液相色谱进行纯化,去除未反应原料、游离荧光染料,减少游离杂质带来的非特异性染色,保障探针纯度满足细胞实验要求。
第一,光学性能稳定,激发 649 nm,发射 670 nm,适配主流荧光成像设备,远红外波段降低生物样本自发荧光干扰。第二,结构接近天然核苷,部分 DNA 聚合酶可以识别该分子,具备整合进入新生核酸链的潜力。第三,水溶性良好,可直接溶解于无菌缓冲液、细胞培养液。第四,共价连接结构稳定,生理环境中不易发生荧光基团脱落,长时间孵育条件下依旧保持探针完整性。
在核酸生物学研究领域,该探针为核酸复制、核苷转运研究提供可视化工具。借助荧光信号,可以追踪脱氧尿嘧啶核苷进入细胞、转运至细胞核的全过程,观测核苷整合至核酸链的动态变化。可用于体外探究核苷转运载体功能,评估不同化合物对核苷摄取过程产生的调控效果。同时应用于体外核酸酶、聚合酶生化实验,直观监测核酸合成相关生化反应进程,丰富核酸代谢基础研究手段。
本文仅针对脱氧尿嘧啶核苷 - CY5 开展科研试剂科普,所有描述仅用于实验室基础科学研究参考。
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