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2026年07月24日 13:48 来源：
一、化合物定义与来源
桃叶珊瑚苷 - CY5（Aucubin-CY5），是环烯醚萜苷天然分子桃叶珊瑚苷与 CY5 近红外荧光染料共价偶联形成的荧光探针。桃叶珊瑚苷属于天然环烯醚萜苷，能够自多种植物中提取分离；CY5 是商业化近红外花菁荧光染料。桃叶珊瑚苷 - CY5 无法从自然界获取，只能依靠体外化学偶联反应人工合成。
探针同时保留桃叶珊瑚苷的分子骨架识别区域与 CY5 荧光光学特性。CY5 拥有近红外激发与发射波长，有效规避细胞自发荧光区间，成像信噪比更高。分子依靠柔性连接臂连接两个功能单元，降低空间位阻，尽可能减少荧光基团对桃叶珊瑚苷分子生物识别行为造成干扰。 探针水溶性取决于连接臂修饰类型，磺酸化 CY5 构建的偶联产物水溶性更好，适配水溶液细胞实验；普通 CY5 衍生物水溶性偏弱。共价连接结构在中性生理缓冲体系中稳定性良好，常温短期孵育不易发生基团解离。
合成流程分为三步：首先对桃叶珊瑚苷分子上羟基位点进行活化，引入可发生偶联反应的活性官能团；选用匹配活性基团的 CY5 荧光染料；在温和液相环境完成偶联反应。反应结束后利用色谱纯化去除游离桃叶珊瑚苷、游离 CY5 染料以及各类副产物。最终采用高分辨质谱验证偶联结构，荧光光谱测试光学参数，筛选合格探针用于后续科研实验。
天然桃叶珊瑚苷本身不具备适合活细胞成像的荧光信号，难以直接追踪其在细胞内部分布。桃叶珊瑚苷 - CY5 提供可视化方案，借助荧光显微镜直观观测该环烯醚萜苷分子跨膜过程、胞内富集区域。 在分子互作研究领域，探针可用于体外亲和实验，筛选能够与桃叶珊瑚苷发生特异性结合的胞内靶标大分子。同时可用于天然产物转运机制研究，观测植物来源小分子在细胞体系内转运路径，解析环烯醚萜苷参与的细胞信号调控相关基础机制，丰富天然产物科研可视化工具库。
本文仅开展科研荧光探针科普，开展活细胞成像实验务必设置对照组，评估偶联修饰对母体分子生物学行为带来的影响。
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