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2026年07月11日 14:10 来源：
阿西替尼 - 生物素（Axitinib-Biotin）属于基于活性的蛋白质组学（ABPP）捕获探针，由激酶靶向小分子阿西替尼与亲和标签生物素通过柔性连接臂共价偶联而成，是蛋白互作垂钓专用科研试剂。阿西替尼母核分子可特异性结合胞内酪氨酸激酶家族蛋白 ATP 结合口袋，生物素标签可与亲和素发生高亲和力特异性结合，二者偶联后完整保留激酶靶向识别能力与亲和纯化标签功能，用于体外细胞裂解液、胞内蛋白复合物靶标蛋白捕获实验，仅通过化学合成制备，无天然内源同源分子抖音百科。
1. 双功能偶联结构：前端阿西替尼靶向基团特异性识别激酶蛋白活性位点，末端生物素亲和标签提供纯化抓手，中间柔性连接臂降低空间位阻，不阻碍小分子与蛋白结合。
2. 缓冲液适配特性：可溶于 DMSO，稀释至中性细胞裂解缓冲液中稳定分散，生理 pH 区间不会发生分子水解断裂；常温避光短期储存稳定，长期保存需低温密封。
3. 蛋白结合特异性保留：生物素偶联修饰不改变阿西替尼与激酶蛋白结合的亲和力、结合位点，体外蛋白孵育体系中靶向结合行为与游离阿西替尼保持一致，不会产生非特异性蛋白结合偏移。
激酶蛋白互作网络解析是细胞信号通路基础研究核心方向，传统蛋白纯化手段无法直接筛选小分子特异性结合靶蛋白。阿西替尼 - 生物素探针可在细胞裂解液孵育阶段结合胞内激酶靶蛋白，随后通过亲和素固相树脂特异性抓取探针 - 蛋白复合物，洗脱后经质谱鉴定，筛选出小分子直接结合的激酶蛋白及下游互作蛋白，构建小分子调控激酶信号通路分子网络。 用于体外激酶小分子作用靶点筛选，挖掘未被报道的潜在结合激酶；细胞信号通路体外验证实验，对比不同处理组激酶蛋白结合丰度变化，解析小分子调控胞内信号传导分子机制；激酶蛋白体外互作验证实验，借助亲和 pull-down 体系验证小分子与靶蛋白直接结合关系。常搭配生物素荧光二抗，实现结合蛋白荧光可视化验证，完善靶标鉴定实验流程。
探针母液使用无水 DMSO 配制，避免水分造成连接臂水解；细胞裂解液孵育全程低温，维持激酶蛋白天然构象；亲和纯化树脂洗涤步骤增加盐浓度梯度，去除非特异性结合杂蛋白，提升靶标蛋白纯度。
本文仅针对阿西替尼 - 生物素探针的蛋白组学化学属性与体外靶标捕获科研用途科普解读，内容仅作实验室蛋白机理研究参考。
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