新维创科普┃罗丹明 B 标记成纤维细胞活化蛋白靶向探针 / RB-FAPI/Rhodamine B-FAPI 多肽荧光探针 / 罗丹明 B 偶联 FAPI 靶向

2026年07月03日 14:03 来源：

一、罗丹明 B 标记成纤维细胞活化蛋白靶向探针基础定义

罗丹明 B 标记成纤维细胞活化蛋白靶向探针，通用缩写 RB-FAPI，是靶向识别多肽 FAPI 与罗丹明 B 荧光发色团共价偶联形成的特异性荧光探针，归属多肽靶向荧光标记试剂范畴。分子由两段功能单元构成，一段为具备特异性识别结合能力的 FAPI 多肽序列，另一段为可见光波段罗丹明 B 荧光基团，通过柔性连接臂完成两段结构偶联，可依靠多肽特异性结合作用实现目标蛋白体外可视化标记，多用于蛋白分子识别、体外细胞荧光成像基础研究。

二、RB-FAPI 靶向荧光探针合成制备流程

该探针采用固相多肽合成联合荧光偶联两步工艺制备，第一步依托固相合成法完整合成高纯 FAPI 靶向多肽序列，脱除侧链保护基团后纯化获得游离多肽；第二步选用羧基活化罗丹明 B 荧光分子，与多肽末端氨基在温和缓冲环境下发生酰胺缩合，通过柔性烷基连接臂衔接荧光团与多肽，降低两部分结构空间位阻对识别能力的影响。反应产物经反相液相色谱多级纯化去除未结合游离罗丹明、短肽碎片，真空低温避光干燥成型，全程控制反应 pH 值，避免多肽序列水解断裂，同时保留罗丹明 B 完整荧光发色结构。

三、罗丹明 B 标记 FAPI 探针核心结构特征

1. 特异性靶向识别结构：FAPI 多肽序列具备专一性分子结合能力，可与对应目标蛋白发生特异性相互作用，区别于无靶向能力的普通罗丹明荧光染料；

2. 可见光稳定荧光信号：罗丹明 B 发射波段处于可见光区间，荧光量子产率稳定，常规荧光显微镜设备即可完成成像观测，无需专用近红外成像设备；

3. 柔性连接臂降低空间干扰：多肽与荧光基团之间引入柔性碳链连接臂，缓解荧光团空间位阻对多肽识别口袋结合的抑制作用，保障靶向结合效率；

4. 共价结合结构稳定：荧光染料与多肽通过酰胺键牢固连接，缓冲液多次漂洗条件下不易发生荧光分子解离，降低非特异性荧光背景信号。

四、RB-FAPI 靶向探针基础科研研究价值

在体外蛋白识别、细胞内蛋白分布可视化基础研究领域具备重要应用价值，无靶向修饰罗丹明染料仅依靠非特异性疏水、静电作用附着样本，标记特异性弱，背景荧光偏高。RB-FAPI 依靠多肽序列专一结合目标蛋白，大幅降低非特异性吸附带来的背景干扰，可用于体外蛋白分子互作基础检测、固定细胞样本内目标蛋白荧光定位观测，直观呈现目标蛋白在细胞内的分布特征。同时完善多肽靶向可见光荧光探针品类，为蛋白基础表征、分子识别机制探究提供低成本可视化实验工具，丰富体外荧光标记基础研究材料库。

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