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2026年07月01日 15:48 来源:
牛磺鹅去氧胆酸 - CY5 属于胆酸骨架修饰的 CY5 荧光示踪探针,以内源胆汁酸类分子牛磺鹅去氧胆酸为靶向识别骨架,通过稳定共价连接臂偶联 CY5 可见光花菁荧光基团,构建兼具生物分子靶向结合能力与荧光发光特性的复合分子。完整保留牛磺鹅去氧胆酸甾环分子骨架,可特异性结合对应转运识别位点,CY5 荧光单元提供可见光光学信号,用于离体细胞、膜转运、脂质代谢基础示踪实验,仅适用于实验室生化机理基础研究。
合成分为活化、偶联、纯化三步,第一步对纯化牛磺鹅去氧胆酸分子末端活性官能团进行温和活化,选用水溶性活化试剂,全程维持生理中性缓冲环境,保护甾环疏水骨架不发生异构分解;第二步选用氨基改性 CY5 荧光染料,与活化胆酸分子发生酰胺偶联反应,将 CY5 荧光基团稳定连接于胆酸分子侧链;反应结束后使用反相液相层析分离体系,去除未参与反应的游离牛磺鹅去氧胆酸、游离 CY5 荧光染料、小分子活化副产物,透析脱盐后低温冷冻干燥,得到纯度均一的荧光标记胆酸探针。工艺严格控制反应 pH 与温度,保障连接臂共价键稳定,在细胞培养液中不易断裂解离。
1. 靶向结合特性完整保留:甾环疏水骨架、牛磺酸侧链结构无破坏,和天然牛磺鹅去氧胆酸拥有一致的分子识别、跨膜转运行为。
2. CY5 荧光波段适配生化成像:发光区间避开多数脂质、蛋白内源自发荧光,成像背景干扰低,适配普通荧光显微镜观测。
3. 两亲分子适配脂质水环境:胆酸骨架自带双亲属性,可溶于水相缓冲液与脂质膜体系,适配细胞膜孵育、脂质体共培养实验。
4. 共价连接稳定性良好:酰胺连接臂耐受常规细胞培养温度、pH 区间,长时间孵育不会出现荧光基团脱落,示踪信号连续稳定。
在脂质转运、细胞膜载体互作、胆汁酸代谢通路、离体膜囊泡基础科研中,牛磺鹅去氧胆酸 - CY5 具备可视化示踪作用。传统牛磺鹅去氧胆酸仅可通过色谱定量检测,无法直观观测分子跨膜转运、胞内分布动态;该荧光探针依靠胆酸骨架模拟内源分子转运行为,CY5 荧光信号可直观呈现分子在细胞膜、囊泡、胞内区域的空间分布,可视化追踪胆汁酸类分子跨膜摄入、胞内转运、囊泡富集动态规律。 离体细胞膜转运机理课题中,借助该探针观测不同培养条件下胆酸分子跨膜速率,筛选可调控膜转运效率的活性小分子,解析胆汁酸跨膜运输基础调控机制;脂质体体外互作实验中,用于观测胆酸分子与人工脂质囊泡结合、融合动态变化,完善两亲分子脂质界面作用理论;同时该荧光标记探针用于荧光成像方法学搭建,对比不同孵育浓度、缓冲液离子强度对成像清晰度的影响,优化离体膜体系荧光示踪标准化实验方案。
本文针对牛磺鹅去氧胆酸 - CY5 胆酸荧光探针开展生化基础科研科普,全部内容仅供脂质、膜生物学课题学习参考,荧光标记胆酸类探针仅用于实验室离体细胞、人工膜基础示踪实验。
点击查看该产品:牛磺鹅去氧胆酸 - CY5
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