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2026年06月24日 14:33 来源：
千层纸素 A - 炔基英文通用名称为 Oroxylin A-Alkyne，是以天然黄酮类分子千层纸素 A 为母核，共价连接炔基官能团形成的功能化小分子探针。千层纸素 A 属于天然黄酮母核化合物，本身具备多羟基芳香环结构，炔基作为可发生点击化学反应的活性基团，修饰至分子侧链后，赋予原黄酮分子生物正交反应活性，是小分子靶标捕获、蛋白互作筛选方向常用化学探针。
该探针分子依靠有机化学修饰合成制备，无法从天然植物组分中直接提取获得。合成分为两个核心阶段，第一阶段提纯天然来源千层纸素 A 母核，对分子羟基位点进行选择性保护，避免修饰过程中母核结构破坏；第二阶段通过烷基化偶联反应，将带有末端炔基的连接臂共价结合至千层纸素 A 活性位点，后续脱除羟基保护基团，完成完整探针构建。合成产物经硅胶柱层析、高效液相色谱分步纯化，去除未反应母核、短链杂质，得到结构单一的炔基修饰黄酮探针。
1. 保留完整黄酮母核骨架：修饰后千层纸素 A 芳香环、羟基结构完整保留，维持分子原有与生物大分子结合的基础结构特性。
2. 末端炔基具备正交反应活性：炔基可与叠氮基团发生铜催化点击化学反应，反应条件温和，不会破坏蛋白、多肽等生物大分子结构。
3. 分子尺寸适配胞内穿透：整体分子量适中，脂水分配系数均衡，可穿透细胞脂质膜结构，进入胞内与靶标分子结合。
4. 修饰位点可控：炔基连接臂定点修饰，不会干扰黄酮母核核心结合区域，不改变分子原有分子识别特性。
该炔基黄酮探针核心用于胞内小分子结合靶标的挖掘与互作机制基础研究。将探针作用于细胞体系后，千层纸素 A 母核可特异性结合胞内互作蛋白，末端炔基作为捕获标签，后续通过点击化学反应偶联固相富集介质，将结合蛋白特异性分离富集。富集后的蛋白可开展质谱鉴定，明确黄酮分子对应的胞内靶标蛋白种类，解析小分子与生物大分子的相互作用模式。同时该探针可用于黄酮类天然小分子结合口袋、分子作用位点的基础验证，完善天然小分子探针工具库，支撑天然产物分子作用机制的基础探索。
本篇仅针对 Oroxylin A-Alkyne 化学探针分子开展基础科普，仅阐述分子合成、结构特征与基础科研应用范畴，不涉及相关衍生实验配套材料介绍。
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