023-68264128 17725097785EN

新闻中心

关注我们,为您提供时实资讯

新维创科普┃连翘脂素 - 生物素适合什么实验?靶点捕获与验证实操指南

2026年04月22日 14:53 来源:

一、产品核心定位

连翘脂素 - 生物素是天然产物靶点研究的 “亲和捕捉工具”,专门解决连翘脂素靶点难以鉴定的问题。它通过生物素与链霉亲和素的超强结合力,能像 “磁铁” 一样,从复杂的生物样本中精准 “抓出” 与连翘脂素结合的蛋白,让你快速锁定研究靶点,为后续机制研究奠定基础。

二、靶点捕获实验标准流程

1. 试剂与样本制备

o 试剂:将连翘脂素 - 生物素溶于 DMSO,配成 1 mM 储备液,-20℃避光保存;

o 样本:收集培养的细胞,用预冷 PBS 洗涤 2 次,加入含蛋白酶抑制剂的裂解液,冰上裂解 30 分钟,4℃12000 rpm 离心 15 分钟,取上清作为蛋白样本。

2. 结合与捕获反应:向蛋白样本中加入试剂工作液(终浓度 1-10 μM),4℃避光孵育 2-4 小时,让试剂与靶点蛋白充分结合。随后加入链霉亲和素磁珠,4℃继续孵育 1 小时,期间轻柔混匀,确保磁珠充分捕获复合物。

3. 洗涤与洗脱:用含 0.1% Tween-20 PBS 洗涤磁珠 5 次,每次 5 分钟,去除非特异性结合蛋白。最后加入洗脱液(如 8 M 尿素),室温孵育 10 分钟,洗脱结合的靶点蛋白,用于后续 Western blot 或质谱鉴定。

三、实验关键优化要点

· 蛋白样本预处理:裂解时需添加蛋白酶抑制剂,防止蛋白降解;样本浓度控制在 1-5 mg/mL,过低影响捕获效率,过高易产生非特异性结合。

· 孵育温度与时间:4℃孵育可降低非特异性吸附,孵育时间需充足,确保结合反应完全,避免因时间不足导致靶点丢失。

· 磁珠用量:根据蛋白样本量调整磁珠用量,一般每 1 mg 蛋白加入 10-20 μL 磁珠,过量磁珠会增加背景干扰。

四、应用拓展与价值

除靶点捕获外,该试剂还可用于连翘脂素的分子相互作用验证 —— 通过 SPR 技术实时监测结合动力学,计算结合常数;也可用于中药复方中连翘脂素活性的评价,对比不同提取工艺下连翘脂素的靶点结合能力。它是连接天然产物与分子机制研究的桥梁,为中药现代化研究提供了可靠的技术手段。

限科学研究使用,严格禁止用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研用途。新维创生物相关试剂均遵循科研用途标准生产与质检。

点击可查看相关产品详情:连翘脂素-生物素

推荐新闻全部

新维创生物科技(重庆)有限公司

2023.06.05

Mannose-CY5甘露糖红色荧光标记多糖类化合物

2024.06.12

FITC-甘露糖Mannose-FITC异硫氰酸荧光素甘露糖荧光标记的优点

2024.05.28

DBCO-CY5与DBCO-CY7化学结构及性质差别/sulfo-cy5-dbco/sulfo-cy7-dbco

2024.05.27

DBCO-CY5荧光标记化合物点击化学反应的特性CY5-二苯并环辛炔2182601-71-2

2024.05.27

Cy5标记胆固醇在生物医学研究中具有广泛的应用领域醇Cholesterol-Cy5

2024.05.23

近红外荧光染料CY5标记胆固醇Cholesterol-Cy5针化合物

2024.05.23

Cholesterol-CY5胆固醇红色而荧光标记甾醇CY5羧基1032678-07-1

2024.05.23

新维创生物(重庆)有限公司 FITC-丝素蛋白绿色荧光标记,Silk fibroin,CAS:96690-41-4 ,Silk fibroin-FITC…

2024.05.18

重庆新维创生物 CY5-MAL马来酰亚胺的光学性质CY5红色荧光染料修饰1437796-65-0

2024.05.18

磺酸基CY5马来酰亚胺巯基反应性荧光染料Sulfo-CY5-MAL

2024.05.13

Sulfo-CY5-MAL︱2242791-82-6︱磺酸基团荧光染料衍生物在生物成像、化学分析的应用…

2024.05.13

阿霉素荧光修饰RB-Doxorubicin罗丹明标记阿霉素药物输送体内示踪

2024.05.11

赖氨酸FITC标记FITC-D-LYS荧光素标记赖氨酸绿色荧光异硫氰酸荧光素生物学应用…

2024.05.11

D-LYS-FITC荧光素标记赖氨酸 多肽标记绿色荧光异硫氰酸荧光素的应用

2024.05.11

FITC-D-LYS荧光素标记赖氨酸绿色荧光异硫氰酸荧光素修饰多肽

2024.05.11

CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的荧光特性1807529-70-9 Sulfo-CY5-amine磺酸基

2024.05.10

CY5-amine/Cy5-NH2/氨基CY5的化学性质近红外荧光染料CY5-NH2 1807529-70-9

2024.05.10

水溶性花菁染料Cy5标记链霉亲和素streptavidin

2023.11.24

水溶性CY5标记叠氮的原理

2023.11.24

荧光探针Sulfo-CY5-azide水溶性叠氮化物

2023.11.24

在氢谱中氨基为什么有两个峰?

2023.07.13

新维创生物汇总HNMR(核磁氢谱)化学位移0-14代表性官能团

2023.07.07

常用于核磁共振的氘代化学品

2023.07.03

NMR所需样品量和内标总结

2023.06.28

什么是核磁共振二维谱(2D NMR)?

2023.06.27

新维创生物利用核磁共振波谱仪分析聚合物结构

2023.06.27

你知道固体核磁和液体和磁的区别吗?

2023.06.20

服务电话

24H 客服电话

17725097785

客服QQ

扫一扫关注我们

添加官方QQ,让沟通更顺畅

官方微信

扫一扫关注我们

扫一扫关注我们,让彼此更了解