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2026年04月10日 14:10 来源:
定义
缬氨酸-CY5.5是一种由必需氨基酸缬氨酸与近红外荧光染料CY5.5偶联形成的小分子探针。缬氨酸属于支链氨基酸家族,是蛋白质合成的基本原料之一。CY5.5的标记使该氨基酸在细胞摄取和转运研究中具备可视化追踪能力。
理化性质
该探针为深绿色至黑色粉末,溶于水、磷酸盐缓冲液及细胞培养基,无需添加有机助溶剂即可使用。缬氨酸部分保留了完整的α-氨基和羧基结构,分子量约700-800 Da。CY5.5染料的近红外吸收峰位于675 nm,发射峰位于694 nm,在生理条件下荧光稳定。
技术优势
缬氨酸-CY5.5具备水溶性好、细胞毒性低、成像背景清晰的优点。其近红外荧光特性使组织穿透深度可达数毫米,适用于完整器官或活体小动物的氨基酸分布研究。与放射性标记相比,该探针无需特殊防护设备,且可实现单细胞水平的空间分辨率。
使用特点
细胞实验中推荐使用浓度为20-100 µM,因氨基酸转运系统具有较高的转运能力,需要适当提高标记物浓度以获得理想信号。孵育时间可设定为5分钟至2小时,根据摄取速率进行调整。检测时需配备近红外荧光成像系统或具备Cy5.5滤光片的流式细胞仪。
应用领域
在氨基酸代谢基础研究中,缬氨酸-CY5.5用于比较不同细胞类型对支链氨基酸的摄取差异。在转运体功能分析中,通过添加未标记氨基酸或特异性抑制剂,可鉴定参与缬氨酸摄取的主要转运蛋白。在3D细胞培养体系中,该探针用于评估球状体内部细胞层的氨基酸可及性梯度。
扩展研究
缬氨酸-CY5.5还被用于氨基酸转运的方向性研究。在Transwell培养系统中,通过测量上下室荧光强度变化,可判断跨细胞层的氨基酸净转运方向。在组织水平研究中,该探针帮助绘制肝小叶内氨基酸摄取的区域差异图谱。此外,结合微流控技术,可建立单细胞水平的氨基酸摄取动力学实时监测平台。
限科学研究使用,严格禁止用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研用途。新维创生物相关试剂均遵循科研用途标准生产与质检。
日期:2026-04-10
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