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2025年11月20日 10:46 来源：
“FITC-华法林钠”并不是一种天然存在的化合物，而是一种人工合成的荧光标记物，由两个部分组成：
华法林钠（Warfarin sodium）：一种临床上广泛使用的抗凝血药物。
FITC（Fluorescein isothiocyanate，异硫氰酸荧光素）：一种常用的绿色荧光染料，常用于生物标记。
1. 华法林钠（Warfarin Sodium）
化学名称：4-羟基-3-(3-氧代-1-苯基丁基)香豆素钠盐
分子式：C₁₉H₁₅NaO₄
理化性质：
白色结晶性粉末
微溶于水，易溶于乙醇、氯仿等有机溶剂
具有手性（通常使用S-构型，活性更强）
生理功能/药理作用：
抑制维生素K环氧化物还原酶（VKOR），干扰维生素K循环
阻止凝血因子II、VII、IX、X的γ-羧化，从而抑制其活化
临床用于预防和治疗血栓栓塞性疾病（如深静脉血栓、肺栓塞、房颤相关卒中等）
2. FITC（异硫氰酸荧光素）
化学结构：含异硫氰酸酯（–N=C=S）官能团的荧光素衍生物
分子式：C₂₁H₁₁NO₅S
理化性质：
黄橙色粉末
激发波长 ~495 nm，发射波长 ~519 nm（绿色荧光）
异硫氰酸酯基团可与伯胺（–NH₂）发生亲核加成，形成稳定的硫脲键（–NH–CS–NH–）
常用于标记蛋白质、多肽、小分子药物等
由于华法林本身不含游离伯胺（–NH₂），直接与FITC反应较困难。因此，构建FITC-华法林钠通常需要以下策略之一：
方法1：引入连接臂（Linker）
在华法林分子上通过化学修饰（如在4-位羟基或苯环上）引入一个含伯胺的连接臂（如氨基己酸、乙二胺等）。
然后利用该伯胺与FITC的异硫氰酸酯基团反应，形成共价偶联产物。
方法2：使用华法林衍生物
合成带有–NH₂或–COOH官能团的华法林类似物，再与FITC偶联。
最终产物结构大致为：华法林–Linker–NH–CS–NH–FITC
该过程通常在无水DMF或碳酸盐缓冲液（pH 8.5–9.5）中进行，避光操作以防止FITC降解。
这种偶联物并非用于临床治疗，而是作为科研工具，主要用于：
靶点识别与结合研究：
利用荧光信号追踪华法林在细胞或组织中的分布
研究其与靶蛋白（如人血清白蛋白 HSA、VKOR、CYP2C9等）的结合特性
竞争性结合实验：
通过荧光偏振（FP）、荧光共振能量转移（FRET）或流式细胞术，检测未标记华法林或其他药物对FITC-华法林结合的抑制能力
药物递送或纳米载体研究：
将FITC-华法林负载于纳米颗粒中，通过荧光成像观察药物释放行为或靶向效率
体外诊断探针开发：
用于高通量筛选华法林代谢酶（如CYP2C9）的抑制剂或诱导剂
四、作用功能
荧光示踪剂：可视化药物在材料中的负载、释放或迁移过程
分子识别元件：作为配体用于构建基于华法林-蛋白相互作用的生物传感器
模型药物：用于验证药物控释系统的性能（因其具有明确的药理背景和可检测的荧光信号）
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