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Sulfo-CY3-Alkyne,炔基标记CY3磺化构建反应

2025年11月04日 10:10 来源:

一、化学组成与结构定义

Sulfo-CY3-炔基(CAS号:2055138-87-7)是一种基于经典花青素类荧光染料Cy3的衍生物,其分子结构由三部分核心功能基团构成:Cy3荧光团提供橙红色荧光信号(发射波长570-580 nm),磺酸基团(-SO₃H)通过引入负电荷增强水溶性,末端炔基(-C≡CH)赋予其参与点击化学反应的活性。这种结构使其成为兼具荧光标记与化学偶联功能的双功能分子。

二、物理化学特性

光学性能:在550-560 nm激发波长下,量子产率高达0.3-0.5,光稳定性优于传统荧光素,光漂白速率降低40%以上,适合长时间动态追踪。

溶解性:磺酸基团使其在PBS、细胞培养基等水相体系中溶解度超过10 mg/mL,避免有机溶剂对生物样本的损伤。

反应活性:炔基官能团可与叠氮化物在Cu(I)催化下发生环加成反应(CuAAC),反应效率达90%以上,且条件温和(室温、pH 6-8)。

三、实验应用场景

蛋白质动态追踪:通过基因编辑技术将叠氮化物修饰的氨基酸(如Azido-homoalanine)掺入目标蛋白,再与Sulfo-CY3-炔基反应,实现活细胞内蛋白迁移路径的实时成像。

核酸标记与检测:利用叠氮化修饰的核苷酸探针(如PNA-N₃)与Sulfo-CY3-炔基结合,开发高灵敏度DNA/RNA检测试剂盒,检测限低至10 pM

纳米材料功能化:将炔基修饰的量子点(QD-alkyne)与Sulfo-CY3-炔基通过点击化学偶联,构建双色荧光纳米探针,用于肿瘤细胞的多模态成像。

四、结构构建策略

Sulfo-CY3-炔基的合成通过两步法实现:首先在Cy3染料分子上引入磺酸基团(如通过磺化反应),随后通过亲核取代反应在特定位置接入炔基官能团。关键控制点包括:

磺化程度需精确至2-3个磺酸基团,以平衡水溶性与荧光强度;

炔基位置需远离荧光团核心,避免影响电子跃迁路径;

最终产物需通过HPLC纯化,确保纯度>95%,避免副反应干扰。


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